[發明專利]一種拳參與珠芽蓼、草血竭的鑒別方法

有效

• 申請號: 201910441314.8
• 申請日: 2019-05-24
• 公開（公告）號: CN110082455B
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發明（設計）人: 林林;林永強;于鳳蕊;穆向榮;解盈盈
• 申請（專利權）人: 山東省食品藥品檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京索睿邦知識產權代理有限公司 11679
• 代理人: 劉麗

本發明涉及藥材鑒別技術領域，特別涉及一種拳參與珠芽蓼、草血竭的鑒別方法，以綠原酸、3,5?O?二咖啡酰奎寧酸和4,5?O?二咖啡酰奎寧酸三個成分作為區分物質。本發明的方法簡單易操作，分析時間短，準確率高，達到100%，是一種適合推廣使用的方法。

技術領域

本發明涉及藥材鑒別技術領域，特別涉及一種拳參與珠芽蓼、草血竭的鑒別方法。

背景技術

拳參為蓼科植物拳參Polygonum bistorta L.的干燥根莖。呈扁長條形或扁圓柱形，彎曲，有的對卷彎曲，兩端略尖，或一端漸細，長6～13cm，直徑1～2.5cm。表面紫褐色或紫黑色，粗糙，一面隆起，一面稍平坦或略具凹槽，全體密具粗環紋，有殘留須根或根痕。質硬，斷面淺棕紅色或棕紅色，維管束呈黃白色點狀，排列成環。氣微，味苦、澀。珠芽蓼為蓼科植物珠芽蓼Polygonum viviparnm L.的干燥根莖。草血竭為蓼科蓼屬植物紅莖蓼Polygonum paleaceum Wall.的干燥根莖。三者同為廖科植物，珠芽蓼和草血竭與拳參的外形特征較為接近。

有文獻曾采用顯微橫切面觀察法對三者進行區分，差異不顯著；有文獻曾采用聚類法對三者水溶性成分的HPLC指紋圖譜進行分析，可以進行適當區分，但是對于樣本量的要求過于嚴格；有文獻曾采用HPLC-MS-MS法對三者水溶性成分進行分析，主要成分基本一致，僅存在量的少量差異。各種方法效果均不理想。

按照現行的《中國藥典》2015年版一部進行檢驗，性狀、顯微鑒別、沒食子酸的薄層鑒別及 HPLC法含量測定均無法對三者進行有效區分，造成市場上珠芽蓼和草血竭代替拳參使用的現象比較普遍。造成這種問題出現的原因，主要是上述檢驗項目專屬性不強。所以，找到拳參與珠芽蓼、草血竭具有差異的檢測成分，才能進行有效鑒別。

發明內容

為了解決以上現有技術中拳參藥材檢驗方法中存在的問題，將拳參與珠芽蓼、草血竭進行有效區分，本發明公開了一種檢驗準確度高、方法簡便的拳參與珠芽蓼、草血竭的鑒別方法。考慮到目前對極性較大的水溶性成分的研究普遍效果不理想，本發明將研究方向進行了調整，以極性較低成分進行研究，選定的樣品提取條件和色譜條件主要針對該類成分。

高效液相色譜法(配二極管陣列檢測器)可以實現對拳參低極性成分進行分離，并實現拳參與珠芽蓼、草血竭的有效鑒別。高效液相色譜可以對樣品所含的不同化學成分先進行分離，二極管陣列檢測器可以進行光譜圖的比較，配合使用以達到鑒別的目的，并保證結果的準確性。

本發明是通過以下步驟得到的：

一種拳參與珠芽蓼、草血竭的鑒別方法，將待測樣品粉碎，使用有機溶劑提取后，采用高效液相色譜儀進行檢測，若檢出綠原酸成分，未檢出3,5-O-二咖啡酰奎寧酸和 4,5-O-二咖啡酰奎寧酸兩個成分，則待測樣品為拳參；若同時檢出綠原酸、3,5-O-二咖啡酰奎寧酸和4,5-O-二咖啡酰奎寧酸三個成分，則待測樣品為珠芽蓼或草血竭。

在差異成分3,5-O-二咖啡酰奎寧酸和4,5-O-二咖啡酰奎寧酸的篩選及確認過程中進行了大量的工作。由于拳參主要含有沒食子酸和鞣質類成分，目前關于拳參的成分研究工作主要為水溶性成分的研究。鑒于拳參、珠芽蓼、草血竭中水溶性成分差異不明顯，我們創新性地對三種藥材的脂溶性成分進行了研究。

經過反復對比試驗，采用低極性溶劑，對拳參、珠芽蓼、草血竭的脂溶性成分進行提取，采用高效液相色譜法進行分離，得到三種藥味的脂溶性成分特征圖譜。通過對特征圖譜的分析比對，得到三種藥味的差異性成分，并進一步采用高效液相色譜-質譜聯用儀對差異性成分進行鑒定。通過質譜解析以及對照品比對，最終確認差異成分為3,5-O-二咖啡酰奎寧酸和4,5-O-二咖啡酰奎寧酸。