[發(fā)明專利]一種毛孢子菌的檢測(cè)試劑盒及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910438041.1
• 申請(qǐng)日: 2019-05-22
• 公開（公告）號(hào): CN110133263A
• 公開（公告）日: 2019-08-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 賴演媚;劉靈輝;賴柔貝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州愛康生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/569
• 分類號(hào): G01N33/569;G01N33/531;G01N21/78
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文;宋靜娜

1.一種毛孢子菌檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包含毛孢子菌捕獲抗體包被的酶標(biāo)板、毛孢子菌檢測(cè)抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、樣本稀釋緩沖液、包被緩沖液、封閉緩沖液、底物溶液及終止液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述毛孢子菌捕獲抗體為抗TA-Ag小鼠多克隆抗體。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述毛孢子菌檢測(cè)抗體為抗TA-Ag兔多克隆抗體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述抗TA-Ag兔多克隆抗體的效價(jià)比大于或等于1：5000。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述樣本稀釋緩沖液為Tris-Cl緩沖液、磷酸緩沖液或檸檬酸緩沖液的一種或多種的組合，所述樣本稀釋緩沖液的濃度為10～100mM，含有1.0～5.0％的封閉劑、0.01～0.05％非離子型去污型、0.1～5.0％的蛋白穩(wěn)定劑、50～200mM NaCl、0.01～0.05％防腐劑，pH值為7.0～8.0。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述包被緩沖液為0.05～0.1M碳酸緩沖液，pH值為9.0～9.6。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述封閉緩沖液為Tris-Cl緩沖液、磷酸緩沖液或檸檬酸緩沖液的一種或多種的組合，所述封閉緩沖液的濃度為10～100mM，含有1.0～5.0％的封閉劑、0.01～0.05％的非離子型去污型，50～200mM NaCl，pH值為7.0～8.0。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述底物溶液為TMB顯色溶液。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述終止液為2M H₂SO₄溶液。

10.權(quán)利要求1～9任一項(xiàng)所述檢測(cè)試劑盒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:

1)用包被緩沖液稀釋毛孢子菌捕獲抗體，加入酶標(biāo)板的孔中，靜置包被；

2)向步驟1)所得孔中入封閉緩沖液進(jìn)行封閉，之后進(jìn)行干燥、冷藏；

3)標(biāo)準(zhǔn)品的制備：通過裂解毛孢子菌獲得TA-Ag總抗原，加入血清稀釋所得溶液作為陽性對(duì)照樣本，無添加TA-Ag總抗原的血清作為陰性對(duì)照樣本；

4)毛孢子菌檢測(cè)抗體用抗體稀釋液稀釋到工作濃度；以及

5)提供顯色溶液、樣品稀釋緩沖液、濃縮洗滌液、封閉液，與步驟1)～4)所得，整合、包裝即得所述檢測(cè)試劑盒。