[發明專利]一種牡丹蛋白肽的制備方法

在審

• 申請號: 201910432550.3
• 申請日: 2019-05-23
• 公開（公告）號: CN110205352A
• 公開（公告）日: 2019-09-06
• 發明（設計）人: 王世英;趙欣;謝瑞生
• 申請（專利權）人: 世堃堂（廣東）生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 張學府

1.一種牡丹蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述方法步驟為：

S1：將牡丹籽粕粉碎，用超臨界CO₂萃取脫脂，過篩，按料液比1:20～30與水混合，加入NaOH調節pH9～10，50～60℃條件下磁力攪拌60～70min，離心(3500～4000r/min，13～18min)，取上清液，加入HCl，調節pH3～4，離心(3500～4000r/min，13～18min)，沉淀用少量去離子水清洗至中性后冷凍干燥，得牡丹籽蛋白；

S2：將S1所得牡丹籽蛋白溶解，溶解液用超臨界CO₂萃取，萃取壓力10-14MPa，萃取100～120min，萃取完后常溫靜置半小時，收集蛋白液；

S3：取步驟S2所得蛋白液3份，加入復合蛋白酶進行酶解，所述復合蛋白酶包括胰凝乳蛋白酶1～2份，果膠酶3～5份，酶活力為110～120u/mL，酶解反應pH6.5～7.0，反應溫度40～60℃，反應時間2～4h，酶解后，高溫滅活，加入8％～12％的HCl，調節pH至4.0～4.5，在90～100r/min條件下攪拌，過濾分離，提純后噴霧干燥得牡丹蛋白肽。

2.根據權利要求1所述牡丹蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟S3中的復合蛋白酶為β-半乳糖苷酶和a-葡萄糖苷酶，加入β-半乳糖苷酶1～2份，a-葡萄糖苷酶4～5份，酶活力為80～90u/mL，酶解反應pH為6.0～7.0，反應溫度40～45℃，反應時間3～4h，酶解后，高溫滅活，加入8％～12％的HCl，調節pH至4.0～4.5，在70～80r/min條件下攪拌，過濾分離，提純后噴霧干燥得牡丹蛋白肽。

3.根據權利要求1所述牡丹蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述步驟S3中的復合蛋白酶為纖維素酶和糖化酶，加入纖維素酶1～3份，糖化酶5～6份，酶活力為95～105u/mL，酶解反應pH5.0～7.0，反應溫度48～53℃，反應時間3～4h，酶解后，高溫滅活，加入8％～12％的HCl，調節pH至4.0～4.5，在55～65r/min條件下攪拌，過濾分離，提純后噴霧干燥得牡丹蛋白肽。

4.根據權利要求1，2或3所述牡丹蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述牡丹籽粕為帶種皮的牡丹籽粕，或者不帶種皮的牡丹籽粕。

5.根據權利要求1所述牡丹蛋白肽的制備方法，其特征在于，所述S1中過80～100目篩。

6.根據權利要求1所述所述牡丹蛋白肽的制備方法，其特征在于：所述S3酶解反應pH6.8，反應溫度為58℃，反應時間為2.5h，酶解后95℃高溫滅活15min。

7.根據權利要求2所述所述牡丹蛋白肽的制備方法，其特征在于：所述酶解反應pH為6.5，反應溫度為43℃，反應時間為3.5h，酶解后95℃高溫滅活15min。

8.根據權利要求3所述所述牡丹蛋白肽的制備方法，其特征在于：所述酶解反應pH為6.0，反應溫度為50℃，反應時間為3.5h，酶解后95℃高溫滅活15min。