[發明專利]促進牛體外胚胎培養受精卵發育的方法

在審

• 申請號: 201910421471.2
• 申請日: 2019-05-21
• 公開（公告）號: CN110066763A
• 公開（公告）日: 2019-07-30
• 發明（設計）人: 王小武;郭晶;王娜;郝少強;趙明禮;張月橋;楊尚斌;何偉;馬毅;郭春明
• 申請（專利權）人: 天津博裕力牧科技有限公司;天津中科博雅生物育種研究有限公司;天津力牧鼎豐生物技術有限公司
• 主分類號: C12N5/073
• 分類號: C12N5/073;C12N5/075
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及促進牛體外胚胎培養受精卵發育的方法。一方面，本發明提供了一種胚胎培養液，其包含氯化鈉、氯化鉀等物質。另一方面，提供了牛體外受精胚胎培養的方法，包括步驟：(1)卵母細胞的采集和體外成熟；(2)體外受精；(3)胚胎體外培養及保存，受精卵在本發明胚胎培養液中培養后冷凍保存。本發明方法呈現優異技術效果，例如能夠大大提高受精卵發育程度。

技術領域

本發明屬于動物繁殖技術領域，涉及一種用于農業-畜牧獸醫繁殖的技術，具體涉及一種牛體外受精胚胎培養的方法，另外，本發明還涉及牛體外受精胚胎培養的相關培養液在牛體外受精胚胎培養中的應用。進一步的，本發明還涉及使用該牛體外受精胚胎培養的相關培養液進行牛體外受精胚胎培養的方法。特別是，本發明牛體外受精胚胎培養的方法具有優異的技術效果，例如能夠以低成本的方法獲得較高的培養效率。特別是，本發明涉及一種從牛進行活體或離采集體卵母細胞進而進行體外受精以及胚胎培養的方法。更特別是，本發明涉及一種在牛體外胚胎培養過程中促進卵母細胞體外成熟的方法，和/或涉及一種在牛體外胚胎培養過程中促進受精卵發育的方法。

背景技術

體外受精(In Vitro Fertilization)或(external fertilization)是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環境中完成受精過程的技術，英文簡稱為IVF。由于它與胚胎移植技術(ET)密不可分，又簡稱為IVF-ET。在生物學中，把體外受精胚胎移植到母體后獲得的動物稱試管動物(test-tube animal)。這項技術成功于20世紀50年代，在最近20年發展迅速，現已日趨成熟而成為一項重要而常規的動物繁殖生物技術。

體外胚胎生產(IVP)技術，尤其是例如活體采卵-體外胚胎生產(OPU-IVP)技術，是通過活體采集優秀個體卵母細胞，經體外成熟(IVM)、體外受精(IVF)、胚胎體外培養(IVC)等，在體外條件下可快速獲得大量優質胚胎。相比體內胚胎，其生產效率高達4～8倍(Blondin P.Logistics of large scale commercial IVF embryo production.ReprodFertil Dev.2016 Jan；29(1):32-36)，能有效提升優良母畜繁殖潛力。目前，國外牛OPU-IVP技術已達到較高水平(Merton JS,de Roos AP,Koenen EP,Roelen BA,Vos PL,Mullaart E,Knijn HM.Bovine OPU-derived oocytes can be matured in vitro for16-28h with similar developmental capacity.Reprod Domest Anim.2012 Dec；47(6):1037-42；Oliveira LH,Sanches CP,Seddon AS,Veras MB,Lima FA,Monteiro PLJ Jr,Wiltbank MC,Sartori R.Short communication:Follicle superstimulation beforeovum pick-up for in vitro embryo production in Holstein cows.J Dairy Sci.2016Nov；99(11):9307-9312；Cavalieri FLB,Morotti F,Seneda MM,Colombo AHB,AndreazziMA,Emanuelli IP,Rigolon LP.Improvement of bovine in vitro embryo productionby ovarian follicular wave synchronization prior to ovum pick-up.Theriogenology.2018 Sep 1；117:57-60)，部分地區已實現商業化應用。但我國在該技術領域仍存在效率較低等不足，限制了其使用。