[發明專利]一種食品脂質提取及檢測食品脂質的方法

有效

• 申請號: 201910420276.8
• 申請日: 2019-05-20
• 公開（公告）號: CN110243956B
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發明（設計）人: 陳歷俊;趙軍英;姜鐵民;喬為倉;劉茜;劉妍;張明輝;王筱迪;張瀅
• 申請（專利權）人: 北京三元食品股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京悅和知識產權代理有限公司 11714
• 代理人: 司麗春

本發明提供了一種食品脂質提取方法和食品中脂質的檢測方法，所述食品脂質提取方法通過將食品樣品與超純水、甲醇和二氯甲烷進行多次混合和離心，多次離心后所得下層有機相即為脂質。本發明采用少量樣本，通過較為安全的脂質提取試劑，經過一次處理，得到不同脂質的提取物后，同時或分別對其進行定性和定量檢測。以減少樣本用量，提高安全性，節約樣品預處理和檢測過程中的耗材，降低成本并提高效率。

技術領域

本發明涉及食品提取及檢測領域，具體涉及一種食品脂質提取及檢測食品脂質的方法。

背景技術

脂質是食品中的主要營養成分，主要包括8大類：脂肪酸、甘油酯(包括甘油三酯、甘油二酯、單甘脂)、甘油磷脂(磷脂酰膽堿PC、磷脂酰乙醇胺PE、磷脂酰肌醇PI、磷脂酰絲氨酸PS、磷脂酰甘油PG、磷脂酸PA)、鞘脂類(神經酰胺Cer、鞘磷脂SM)、糖脂(神經節苷脂GM、GD)、固醇脂類、孕烯醇酮脂、多聚乙烯類。自2003年脂質組學概念被提出以來，食品脂質組學對健康及預防疾病的重要性逐漸被認知。

母乳脂質是人類母乳中僅次于乳糖的第2大組分，主要包括甘油酯、甘油磷脂、固醇脂類和糖脂類，在初乳中含量高達40g/L。母乳不僅為純母乳喂養嬰幼兒生長發育提供了40-55％的能量，磷脂還是細胞和細胞器膜結構不可缺少的成分，并具有抵抗各種代謝疾病的功能，神經節苷脂是大腦脂質和大腦皮層的重要組成物質。我國的母乳喂養率不到29％，母乳成分數據的有力支撐可成為促進母乳喂養的有效方式之一；母乳成分也是嬰幼兒奶粉配方設計的黃金標準。因母乳脂質受母親基因、膳食、環境等因素影響，明確母乳脂質的種類及含量，需檢測不同區域、不同哺乳階段、不同種族等有代表性的母乳樣本，建立母乳脂質數據庫。但母乳是嬰幼兒尤其是0-6月母乳喂養嬰兒的唯一食品，所以母乳樣本的采集難度較大，且采集的樣本量較少。因此，母乳脂質數據庫的建立依賴于高通量的檢測方法，既要提高檢測通量，又要減少母乳樣本用量，并確保大批量樣本檢測過程中檢測人員的安全性。所以，建立高通量、低樣本消耗、安全的母乳脂質檢測方法，是分析母乳成分進而促進母乳喂養并開發更加營養健康的嬰幼兒配方粉的必要前提。

各種固體、液體食品設計時，脂質組成是其營養功能的重要方面。尤其為了設計更加科學合理的嬰幼兒配方食品，需對現有的嬰幼兒配方食品中脂質組成進行檢測，并對不同嬰幼兒食品配料中的脂質組成進行定性和定量分析。同樣都需要高通量、安全檢測技術。

目前，食品尤其是母乳、乳品及配料中脂質的檢測方法主要是基于檢測甘油酯、磷脂(包括甘油磷脂和鞘磷脂)、脂肪酸、神經節苷脂的不同目標，將樣品分別經不同方法前處理后，采用不同的儀器方法檢測。其中前處理方法主要包括傳統的Folch法和BlighDyer法提取甘油酯或磷脂：

1)Folch法

25倍稀釋，2g奶+50g氯仿/甲醇2:1+5mlNaCl(0.05M)，200rpm搖20min，5000rpm離心20min，去除底層氯仿層，上層甲醇層加入35ml氯仿，重復上述過程，下層氯仿層與上次的混合，蒸干，-20℃保存備用；然后用固相萃取柱把中性甘油酯與極性磷脂分開。

固相萃取具體過程包括：50mg脂質提取物溶解在1mL氯仿/甲醇(95:5，v/v)混合液中，硅膠柱(500mg)先用5mL氯仿/甲醇(95:5，v/v)活化，再加入脂質溶液，甘油三酯用10mL氯仿/甲醇(95:5，v/v)洗脫，磷脂用5mL甲醇和5mL氯仿/甲醇/水(3:5:2,v/v/v)混合溶液洗脫，洗脫液蒸干后，復溶到氯仿/甲醇(2:1,v/v)中用于檢測。