[發明專利]一種含鐵蛋白的熒光鑒定方法

有效

• 申請號: 201910411202.8
• 申請日: 2019-05-16
• 公開（公告）號: CN110129032B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 李艷霞;繆玲;黃露;陳毅挺
• 申請（專利權）人: 閩江學院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;C09K11/06
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 饒文君;蔡學俊

1.一種含鐵蛋白的熒光鑒定方法，其特征在于：包括如下步驟：

1）石墨烯量子點的制備

稱取直鏈淀粉，溶于25 mL蒸餾水中，60 ℃水浴加熱15 min，轉入反應釜中，烘箱中加熱，自然冷卻后移出，離心得黃色澄清液體于冰箱中冷藏，備用；

2) 石墨烯量子點與蛋白質的相互作用

取步驟1）中的石墨烯量子點溶液和蛋白質水溶液1：1 V/V混合，混勻，再加入與石墨烯量子點溶液同等體積的純水，混勻，離心，取上清于 微量石英比色皿中，熒光光譜掃描；

步驟1）中直鏈淀粉來源土豆，分子式(C₆H₁₀O₅)n，分子量502.42，直鏈淀粉用量0.1~0.5g；

步驟1）中反應釜體積50 mL，水熱反應溫度150~250 ℃，反應時間0.5~5 h，高速離心轉速10000~16000 r/min，離心10~3 min，所得石墨烯量子點溶液為黃色澄清液；

步驟2）中蛋白為辣根過氧化物酶、細胞色素C、肌紅蛋白、馬脾鐵蛋白、轉鐵蛋白、牛血紅蛋白、刀豆蛋白、牛血清白蛋白、卵清蛋白、溶菌酶中的一種，蛋白質水溶液濃度范圍0.01~10 mg/mL；

步驟2）中含鐵蛋白：辣根過氧化物酶、細胞色素C、肌紅蛋白、馬脾鐵蛋白、轉鐵蛋白、牛血紅蛋白可有效猝滅石墨烯量子點熒光，其余不含鐵蛋白：刀豆蛋白、牛血清白蛋白、卵清蛋白、溶菌酶對石墨烯量子點熒光無顯著影響；

步驟2）中熒光光譜掃描條件為激發波長360 nm，光譜掃描范圍390-450 nm，最大發射波長是440 nm；熒光光譜分析前混合樣品需要離心，去沉淀，取上清液。