[發(fā)明專(zhuān)利]一種刺激誘導(dǎo)單個(gè)核細(xì)胞擴(kuò)增為γδT細(xì)胞的組合物及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910404788.5
• 申請(qǐng)日: 2019-05-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110272871B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄧蒙蒙;程簫;劉丹;吳疆;王保如
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 安徽瑞達(dá)健康產(chǎn)業(yè)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/0783
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/0783
• 代理公司: 合肥方舟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 34158
• 代理人: 劉躍

1.一種刺激誘導(dǎo)外周血單個(gè)核細(xì)胞體外擴(kuò)增為γδT細(xì)胞的方法，包括以下步驟：

1)外周血單個(gè)核細(xì)胞的制備：采集外周血，肝素抗凝，采用淋巴細(xì)胞分離液分離獲得外周血單個(gè)核細(xì)胞，并用PBS緩沖液重懸洗滌細(xì)胞兩次；

2)γδT細(xì)胞的誘導(dǎo)：加入僅添加10％的自體血漿、終濃度為2.5μM的唑唻磷酸和終濃度為500U/mL的IL-2的GT-T551 H3體外刺激4天后進(jìn)行半量換液，置于37℃、5％CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

3)每2～3天根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果補(bǔ)液，14～21天收獲γδT細(xì)胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的刺激誘導(dǎo)單個(gè)核細(xì)胞體外擴(kuò)增為γδT細(xì)胞的方法，其特征在于：所述的外周血單個(gè)核細(xì)胞的濃度為1×10⁶cells/mL。