[發明專利]一種基于兩自由度連續離心機的細胞分離方法

在審

• 申請號: 201910403677.2
• 申請日: 2019-05-15
• 公開（公告）號: CN110079439A
• 公開（公告）日: 2019-08-02
• 發明（設計）人: 高會軍;林偉陽;佟明斯;楊憲強;于興虎;張建
• 申請（專利權）人: 林偉陽
• 主分類號: C12M1/04
• 分類號: C12M1/04;C12M1/02;C12M1/00
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 牟永林

1.一種基于兩自由度連續離心機的細胞分離方法，其特征在于所述基于兩自由度連續離心機的細胞分離方法步驟如下：

步驟一、準備四個溶液存儲器和一個廢液存儲器(16)：

分別為第一溶液存儲器(11)、第二溶液存儲器(12)、第三溶液存儲器(13)和第四溶液存儲器(14)，向第一溶液存儲器(11)內裝入清洗液，向第二溶液存儲器(12)裝入溶膠液，向第三溶液存儲器(13)內裝入防凍液，第四溶液存儲器(14)為備用存儲器；

步驟二、四個溶液存儲器分別采用一根管路與離心機(15)的進液口連接，將離心機(15)的出液口與廢液存儲器(16)通過管路連接；

步驟三、將一次性旋轉密封進液裝置(1)安裝在離心機(15)的上端中心處，將細胞溶液加入至離心管(2-3)中，控制離心機(15)開始轉動，在離心機(15)的作用下離心管(2-3)將培養液排除，然后向離心管(2-3)注入溶膠液，溶膠液和細胞在離心管(2-3)內充分混合；

步驟四、清洗殘留在通道和培養瓶內的細胞和溶膠液：

從離心機(15)的進液口充入無菌氣體使得導管內殘留的溶膠液進入離心機(15)內，離心機(15)清洗時間范圍為50-70秒，然后無菌氣體通過排液口排出離心機(15)，細胞質量較大而留在離心管內；

步驟五、將清洗液注入離心機(15)：

打開第一溶液存儲器(11)的閥門，使得清洗液通過離心管(2-3)進入離心機(15)，通過離心機(15)底部的出液口將清洗后的廢液排到廢液存儲器(16)內；

步驟六、控制擺動攪拌機停止上下擺動，細胞全部聚集在離心管的底部，打開第三溶液存儲器(13)的閥門，將防凍液注入到離心管(2-3)內，攪拌后將液體通過出液口排出并保存，細胞被防凍液保護起來。

2.根據權利要求1所述的基于兩自由度連續離心機的細胞分離方法，其特征在于：步驟三中離心管(2-3)的容量為75mL。

3.根據權利要求1或2所述的基于兩自由度連續離心機的細胞分離方法，其特征在于：步驟五中清洗液的用量為1升。

4.根據權利要求3所述的基于兩自由度連續離心機的細胞分離方法，其特征在于：步驟四中控制離心機(15)清洗時間為1分鐘。

5.根據權利要求1-4中任一權利要求所述的基于兩自由度連續離心機的細胞分離方法，其特征在于：所述細胞分離方法采用的基于兩自由度連續離心機所述連續式離心機包括旋轉封閉進液模塊(1)、擺動攪拌機構(2)、轉動平臺(3)、傳動機構(4)、空心主軸(5)、驅動電機(6)和導電滑環(7)；驅動電機(6)靠近導電滑環(7)設置，空心主軸(5)底端固定安裝在導電滑環(7)轉子轉軸上，空心主軸(5)的頂端穿過轉動平臺(3)與旋轉封閉進液模塊(1)的底端固定，空心主軸(5)的外側壁與轉動平臺(3)固定連接，旋轉封閉進液模塊(1)外殼與固定架固定連接，驅動電機(6)轉軸的輸出端通過傳動機構(4)與空心主軸(5)連接，驅動電機(6)通過傳動機構(4)帶動空心主軸(5)轉動，擺動攪拌機構(2)安裝在轉動平臺(3)上，旋轉封閉進液模塊(1)的每個出口端分別通過管路與擺動攪拌機構(2)的一個入口端密封連接，旋轉封閉進液模塊(1)的每個底部入口端分別通過管路與擺動攪拌機構(2)的出口端密封連接，旋轉封閉進液模塊(1)的底部出口端與空心主軸(5)的頂端密封連接。