[發(fā)明專(zhuān)利]一種心腦血管事件風(fēng)險(xiǎn)篩查的試劑盒及其檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910402859.8
• 申請(qǐng)日: 2019-05-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111337440A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張建華
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海底物生化科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/31
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/31
• 代理公司: 上海宏京知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31297
• 代理人: 鄧文武

1.一種心腦血管疾病篩查的試劑盒，其特征在于，包括任選的用于檢測(cè)脂蛋白殘粒膽固醇濃度的試劑。

2.如權(quán)利要求1所述的心腦血管疾病篩查的試劑盒，其特征在于，所述用于檢測(cè)脂蛋白殘粒膽固醇濃度的試劑包括第一反應(yīng)試劑和第二反應(yīng)試劑，所述第一反應(yīng)試劑主要由催化劑、穩(wěn)定劑、第一表面活性劑、第一顯色劑和Good’s緩沖液組成；所述第二反應(yīng)試劑主要由第二顯色劑、第二表面活性劑、膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶和Good’s緩沖液組成，所述Good’s緩沖液的pH值為6.0-8.0。

3.如權(quán)利要求2所述的心腦血管疾病篩查的試劑盒，其特征在于，所述Good’s緩沖液的濃度為50mmol/L-200mmol/L。

4.如權(quán)利要求2所述的心腦血管疾病篩查的試劑盒，其特征在于，所述第一表面活性劑為聚氧乙烯共聚物及其衍生物類(lèi)非離子表面活性劑，所述第二表面活性劑為聚乙二醇烴基酯及其衍生物或聚乙二醇苯基烴基酯及其衍生物類(lèi)非離子表面活性劑，所述第一顯色劑為T(mén)rinder試劑，所述第二顯色劑選自4-氨基安替比林、苯酚、4-氯苯酚中的任意一種。

5.如權(quán)利要求2所述的心腦血管疾病篩查的試劑盒，其特征在于，所述第一表面活性劑的濃度為1％～5％(w/v)；所述第二表面活性劑的濃度為5％～10％(w/v)。

6.一種檢測(cè)脂蛋白殘粒膽固醇濃度的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1，將樣本加入第一反應(yīng)試劑后，37℃孵育5分鐘，讀測(cè)第1點(diǎn)樣本A1；

S2，加入第二反應(yīng)試劑，37℃孵育5分鐘，讀測(cè)第2點(diǎn)樣本A2，△A樣本＝A2-A1；

S3，將校準(zhǔn)品加入第一反應(yīng)試劑后，37℃孵育5分鐘，讀測(cè)第1點(diǎn)校準(zhǔn)品a1；

S4，將校準(zhǔn)品加入第二反應(yīng)試劑后，37℃孵育5分鐘，讀測(cè)第2點(diǎn)校準(zhǔn)品a2，△A校準(zhǔn)品＝a2-a1；

脂蛋白殘粒膽固醇濃度(mg/dL)＝△A樣本/△A校準(zhǔn)品×C_{校準(zhǔn)品}，△A樣本為樣本吸光度變化，△A校準(zhǔn)品為校準(zhǔn)品吸光度變化，C_{校準(zhǔn)品}為校準(zhǔn)品濃度(mg/dL)；

上述測(cè)定的參數(shù)為：溫度30-40℃，主波長(zhǎng)為500-600nm，副波長(zhǎng)600-700nm，樣本或校準(zhǔn)品用量為2-20μL，第一反應(yīng)試劑與第二反應(yīng)試劑的用量比例為2:1-5:1；

所述第一反應(yīng)試劑主要由催化劑、穩(wěn)定劑、第一表面活性劑、第一顯色劑和Good’s緩沖液組成；所述第二反應(yīng)試劑主要由第二顯色劑、第二表面活性劑、膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶和Good’s緩沖液組成，所述Good’s緩沖液的pH值為6.0-8.0。

7.檢測(cè)脂蛋白殘粒膽固醇濃度的試劑在制備心腦血管疾病篩查用試劑中的用途。

8.如權(quán)利要求7所述的用途，所述檢測(cè)脂蛋白殘粒膽固醇濃度的試劑包括第一反應(yīng)試劑和第二反應(yīng)試劑，所述第一反應(yīng)試劑主要由催化劑、穩(wěn)定劑、第一表面活性劑、第一顯色劑和Good’s緩沖液組成；所述第二反應(yīng)試劑主要由第二顯色劑、第二表面活性劑、膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶和Good’s緩沖液組成，所述Good’s緩沖液的pH值為6.0-8.0。

9.如權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述Good’s緩沖液的濃度為50mmol/L-200mmol/L。

10.如權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于，所述第一表面活性劑的濃度為1％～5％(w/v)；所述第二表面活性劑的濃度為5％～10％(w/v)。