[發明專利]一種食用植物油中黃曲霉毒素樣品萃取檢測方法及其凈化槍頭

在審

• 申請號: 201910399165.3
• 申請日: 2019-05-14
• 公開（公告）號: CN110108822A
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發明（設計）人: 靳釗;謝尚晉
• 申請（專利權）人: 蘇州貞成分析儀器有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/02;G01N30/14
• 代理公司: 青島申達知識產權代理有限公司 37243
• 代理人: 蔣遙明

本發明提供了一種食用植物油中黃曲霉毒素樣品萃取檢測方法及其凈化槍頭。將移液技術與樣品凈化技術相結合，可以實現在液體移取的同時，完成待測樣品的凈化過程，大大節省了操作步驟，保證了檢測精度，并且顯著提高了樣品的回收率，檢測重復性好。

技術領域

本發明屬于化學分析檢測技術領域，具體涉及一種食用植物油中黃曲霉毒素樣品萃取檢測方法及其凈化槍頭。

背景技術

黃曲霉毒素是一種劇毒的香豆素類衍生物，由黃曲霉菌代謝產生，一類致癌物。黃曲霉菌多存在于濕熱環境下發霉的糧食當中。而花生、大豆油等多種食用植物油均通過油料作物發酵釀造制得。因此這些油料作物如若采用被黃曲霉菌污染，所得產品中也有很大可能含有黃曲霉毒素，從而影響消費者健康。

食用植物油中的物質組成復雜多樣，食品成分分析前需要對干擾的物質進行凈化處理，以便順利完成檢測。常用的萃取方法是固相萃取方法，①這種方法需要專門的處理設備，成本高，不利于快速檢測及野外檢測的環境。②在萃取過程中，樣品需要慢慢流經固相柱，并用大量溶劑不斷洗脫，耗時過長且操作不便。③樣品在萃取后需要二次轉移到檢測設備當中進行檢測。其難以避免與外界環境發生接觸，容易引起二次污染，影響檢測的精度。移液槍是分析檢測過程必備的液體移取工具，移液精度高，廣泛應用于食品、環境、生物檢測領域。

發明內容

為了提高檢測工作效率，提高檢測精度，本發明提供一種食用植物油中黃曲霉毒素樣品萃取檢測方法，將移液技術與樣品凈化技術相結合，可以實現在液體移取的同時，完成待測樣品的凈化過程，大大節省了操作步驟，保證了檢測精度。

本發明提供一種食用植物油中黃曲霉毒素樣品萃取檢測方法，檢測步驟包括：(1)樣品提取：取待檢樣品用提取溶劑定容，振蕩提取，收集上清液為樣品提取液；(2)樣品吸液：采用移液槍定量吸取樣品提取液；(3)凈化萃取：采用移液槍繼續定量吸取空氣，并將移液槍頭超聲處理，振動及鼓動樣品提取液中氣泡，使移液槍頭內凈化萃取材料吸附待測組分；(4)樣品排液：將移液槍內殘液排出；(5)樣品洗脫：抽取洗脫溶劑，重復(3)、(4)步驟操作，使移液槍頭內凈化萃取材料洗脫待測組分，合并各殘液得到樣品洗脫液；(6)樣品檢測：將樣品洗脫液送至檢測設備上機檢測。

其中，在步驟(1)中，提取步驟包括：稱取5g食用植物油樣品于50mL離心管中，用提取液(20mL 84％乙腈/水)定容到25mL，高速均質(≥10,000r/min)5min、搖床(200-300r/min)劇烈振蕩20min或超聲提取30min，用快速定量濾紙過濾并收集濾液或放入離心機(≥7000r/min離心20min)收集上清液，取上清液作為樣品提取液。所述食用植物油優選為花生油、大豆油、玉米油、芝麻油、葵花籽油、菜籽油、橄欖油中的至少一種，及其多種的調和油。

優選的，移液槍槍頭體積容量為(3-15)ml，提取液的樣品吸取量占槍頭體積容量的(10-30)％，吸入空氣占槍頭體積容量(70-90)％。

其中，在步驟(2)中，樣品萃取步驟包括：①取出槍頭，安裝于移液槍，將槍頭伸入待萃取樣品液面以下，按下移液槍吸液，吸入1ml待凈化樣品，停留5s；②將移液槍槍頭移出液面，再次按下移液槍吸液，吸入1ml空氣，使液體與萃取材料充分混合，重復此步驟三次，共吸入4ml空氣；③移液槍顯示5000ul ALL滿載，將槍頭對準2ml樣品瓶，按下移液槍排液；④抽取1ml洗脫溶劑，重復②、③步驟操作，收集并合并凈化和洗脫后的殘液，得樣品洗脫液。

其中，在步驟(5)中，通過高效液相色譜(HPLC)進行分析，檢測條件為：

流動相：A相，水；B相，乙腈-甲醇(50:50，v:v)；

等梯度洗脫條件：A，68％；B，32％；

色譜柱：C18柱(柱長150mm，柱內徑4.6mm，填料粒徑5μm)；

流速：1.0mL/min；