[發明專利]基于基因操作策略構建疾病模型的方法和應用

有效

• 申請號: 201910397466.2
• 申請日: 2019-05-14
• 公開（公告）號: CN110100788B
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 朱獻軍;朱雄;楊牧;李姝錦;楊業明;劉文靜;孫寬祥
• 申請（專利權）人: 電子科技大學附屬醫院·四川省人民醫院
• 主分類號: C12N15/90
• 分類號: C12N15/90
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 覃蛟

1.基于基因操作策略構建疾病模型的方法，所述模型為動物模型，其特征在于，所述疾病模型為視網膜新生血管疾病模型，通過基因操作技術使Emc3基因在目標動物的血管內皮細胞中不表達；

或者所述疾病模型為小腦共濟失調疾病模型，通過基因操作技術使Emc3基因在目標動物的小腦浦肯野細胞中不表達；

通過基因操作技術使Emc3基因在目標動物的血管內皮細胞或小腦浦肯野細胞中不表達是指：通過Cre-loxp基因敲除技術敲除Emc3基因的第二外顯子使Emc3基因在目標動物的血管內皮細胞或小腦浦肯野細胞中不表達；

所述目標動物為小鼠。

2.根據權利要求1所述的基于基因操作策略構建疾病模型的方法，其特征在于，所述基因操作技術包括如下步驟：

對Emc3^loxp/loxp-Pdgfb-Cre小鼠腹腔注射他莫昔芬以誘導Emc3基因敲除。

3.根據權利要求2所述的基于基因操作策略構建疾病模型的方法，其特征在于，Emc3^loxp/loxp-Pdgfb-Cre小鼠出生后的第1、2、3、5天進行腹腔注射他莫昔芬。

4.根據權利要求2所述的基于基因操作策略構建疾病模型的方法，其特征在于，每天腹腔注射他莫昔芬一次，他莫昔芬的注射劑量為50μg/只。

5.根據權利要求1-4任一項所述的基于基因操作策略構建疾病模型的方法，其特征在于，所述視網膜新生血管疾病模型表現出如下特征中的至少一種：

(1)表層或深層視網膜血管發育遲緩，血管發育速度下降18％；

(2)血管密度降低，血管密度下降20％；

(3)血管頂端細胞數目減少，血管頂端細胞數目減少43％；

(4)玻璃體血管退化減緩；

(5)視網膜血管內皮細胞增殖減緩，視網膜血管內皮細胞增值速度下降33％；

或者所述小腦共濟失調疾病模型表現出如下特征中的至少一種：

(1)步態不穩，提起尾部后肢蜷縮；

(2)小腦進行性萎縮，小腦分子層逐漸變薄，顆粒細胞減少；

(3)小腦中浦肯野細胞逐漸減少。

6.由權利要求1-5任一項所述的基于基因操作策略構建疾病模型的方法所得到的疾病模型在研究視網膜新生血管疾病或小腦共濟失調疾病中的應用，其特征在于，所述研究是以非疾病的治療為目的；所述研究為視網膜新生血管疾病發病機制或機理研究或所述研究為篩選治療視網膜新生血管疾病的藥物研究，或者所述研究為小腦共濟失調疾病發病機制或機理研究或所述研究為篩選治療小腦共濟失調疾病的藥物研究。