[發明專利]一種治療抑郁癥的藥物靶點表達和純化方法在審
| 申請號: | 201910394481.1 | 申請日: | 2019-05-13 |
| 公開(公告)號: | CN110079554A | 公開(公告)日: | 2019-08-02 |
| 發明(設計)人: | 張進 | 申請(專利權)人: | 江西晶美瑞生物醫藥有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/866 | 分類號: | C12N15/866;C07K14/47 |
| 代理公司: | 新余市渝星知識產權代理事務所(普通合伙) 36124 | 代理人: | 廖平 |
| 地址: | 341000 江西省贛州市章貢區*** | 國省代碼: | 江西;36 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 藥物靶點 抑郁癥 表達和純化 桿狀病毒 陽性克隆 治療 桿狀病毒表達系統 生物技術領域 小分子抑制劑 片段克隆 誘導表達 抽提桿 感受態 菌株 抗體 小鼠 質粒 篩選 細胞 疾病 轉化 | ||
1.一種針對抑郁癥的藥物靶點表達和純化方法,其特征在于,包括如下步驟:將小鼠TRPC4基因片段克隆到pAntigen Mem載體,篩選陽性克隆;提取質粒,轉化感受態DH10菌株,挑選陽性克隆;抽提桿粒,在桿狀病毒表達系統中產生P3桿狀病毒;將P3桿狀病毒轉導入HEK293S GnTI-細胞,誘導表達,收集純化藥物靶點。
2.根據權利要求1所述的針對抑郁癥的藥物靶點表達和純化方法,其特征在于,所述TRPC4基因片段編碼第1-758號氨基酸序列,其氨基酸序列如sequence No.1所示。
3.根據權利要求1所述的針對抑郁癥的藥物靶點表達和純化方法,其特征在于,轉導時,HEK293S GnTI-細胞密度為2.0-3.0×106細胞/ml,P3桿狀病毒加入體積為細胞液的1/10。
4.根據權利要求1所述的針對抑郁癥的藥物靶點表達和純化方法,其特征在于,細胞培養使用帶擋板的燒瓶。
5.根據權利要求1所述的針對抑郁癥的藥物靶點表達和純化方法,其特征在于,轉導12-24h后,向細胞液中加入丁酸鈉至終濃度為10mM。
6.根據權利要求1所述的針對抑郁癥的藥物靶點表達和純化方法,其特征在于,轉導12-24h后,細胞培養溫度降至30℃。
7.根據權利要求1所述的TRPC4基因片段表達蛋白作為抑郁癥的藥物靶點的應用。
8.一種含有根據權利要求1所述的TRPC4基因片段表達蛋白的治療抑郁癥的藥物。
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