[發(fā)明專利]一種酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽及其制備方法和應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910388775.3 | 申請日: | 2019-05-10 |
| 公開(公告)號: | CN110204608B | 公開(公告)日: | 2020-03-20 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 阮仁全;溫龍平 | 申請(專利權(quán))人: | 美爾健(深圳)生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C07K14/78 | 分類號: | C07K14/78;C12N15/12;C12N15/81;A61K38/39;A61K8/64;A61Q19/00;A61P17/00 |
| 代理公司: | 上海華工專利事務(wù)所(普通合伙) 31104 | 代理人: | 趙孟琴;繆利明 |
| 地址: | 518116 廣東省深圳市大*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 酵母 發(fā)酵 分子 重組 蛋白 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽,其特征在于,所述酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,包括如下氨基酸序列:
鈉鉀ATP酶β亞基結(jié)合域,所述鈉鉀ATP酶β亞基結(jié)合域的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;
纖維蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域,所述纖維蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示;
膠原蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域,所述的膠原蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示;
肝素的結(jié)構(gòu)域,所述的肝素的結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示的;
纖連蛋白的結(jié)構(gòu)域,所述纖連蛋白的結(jié)構(gòu)域包括如SEQ ID NO:6所示的纖連蛋白的整聯(lián)蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域;
所述如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列由SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列順序連接而成。
2.一種編碼如權(quán)利要求1所述的酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽的核苷酸,其特征在于,所述核苷酸的序列如SEQ ID NO:7所示。
3.一種表達載體Chimeric FN,其特征在于,所述表達載體Chimeric FN包括如SEQ IDNO:1所示的氨基酸序列。
4.一種酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
步驟A、在pPIC9K的基礎(chǔ)上插入如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列,獲得編碼ChimericFN蛋白的表達質(zhì)粒;
步驟B、提取步驟A的編碼Chimeric FN蛋白的表達質(zhì)粒的基因組DNA,并線性化,然后與感受態(tài)畢赤酵母混合,至克隆產(chǎn)生后,篩選可表達重組纖連蛋白的菌株;
步驟C、將步驟B篩選的可表達重組纖連蛋白的菌株進行表達純化,獲得酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽。
5.一種如權(quán)利要求1所述的酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽在制備治療促細胞粘附和生長的藥物中的應(yīng)用。
6.一種如權(quán)利要求1所述的酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽在制備治療皮膚損傷愈合和修復(fù)的藥物中的應(yīng)用。
7.一種藥物組合物,其特征在于,包括如權(quán)利要求1所述的酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽。
8.一種美容組合物,其特征在于,包括如權(quán)利要求1所述的酵母發(fā)酵小分子重組纖連蛋白肽。
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