[發明專利]抗腫瘤NK細胞的制備方法及其細胞與應用在審
| 申請號： | 201910376948.X | 申請日： | 2019-05-07 |
| 公開（公告）號： | CN110106202A | 公開（公告）日： | 2019-08-09 |
| 發明（設計）人： | 黃常新;楊麗麗;李永強;王聰潔;張嗣玉;高嵐嵐;葛鉆敏;蘇萌 | 申請（專利權）人： | 杭州師范大學 |
| 主分類號： | C12N15/867 | 分類號： | C12N15/867;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 宋平 |
| 地址： | 311121 浙江省杭*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 轉基因 基因工程載體 制備 趨化因子受體基因 慢病毒載體 細胞 抑制腫瘤 抗腫瘤 轉染 基因 生長 應用 | ||
1.一種轉基因NK細胞的制備方法，所述制備方法為：
將趨化因子受體基因轉到NK細胞中，得到能夠過表達所述趨化因子受體基因的所述轉基因NK細胞。
2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于：
所述趨化因子受體基因是NK細胞的趨化因子受體基因；
優選，所述趨化因子受體基因為：人CCR7基因和/或人CXCR4基因；
優選，所述人CCR7基因的GenBank號為：NM_001301714.1；所述人CXCR4基因的GenBank號為：NM_001008540.2；
優選，所述NK細胞是異體NK細胞；
優選，所述NK細胞是NK92細胞；
優選，所述趨化因子受體基因在所述抗腫瘤NK細胞中穩定過表達。
3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟：
(a)將所述趨化因子受體基因連接到基因工程載體上，形成重組基因工程載體；
(b)將所述重組基因工程載體轉化或轉染所述NK細胞，得到所述轉基因NK細胞；
優選，所述基因工程載體是慢病毒載體，更優選，所述基因工程載體是慢病毒載體PHS-BVC-LW238。
4.一種轉基因NK細胞，所述轉基因NK細胞是如權利要求1-3中任一項所述的制備方法制備得到的所述轉基因NK細胞。
5.一種轉基因NK細胞，所述轉基因NK細胞能夠表達趨化因子受體基因；
優選，所述趨化因子受體基因是NK細胞的趨化因子受體基因；
優選，所述趨化因子受體基因為：人CCR7基因和/或人CXCR4基因；
優選，所述CCR7基因的GenBank號為：NM_001301714.1；所述CXCR4基因的GenBank號為：NM_001008540.2。
6.一種重組基因工程表達載體，所述重組基因工程表達載體中重組有趨化因子受體基因，所述基因工程表達載體能夠用于轉化或轉染NK細胞；
優選，所述趨化因子受體基因是NK細胞的趨化因子受體基因；
優選，所述NK細胞的趨化因子受體基因是人CCR7基因和/或人CXCR4基因；
優選，所述人CCR7基因的GenBank號為：NM_001301714.1；所述CXCR4基因的GenBank號為：NM_001008540.2；
優選，所述重組基因工程表達載體來自慢病毒載體，更優選，所述重組基因工程表達載體來自PHS-BVC-LW238。
7.一種試劑盒，所述試劑盒中含有如權利要求4或5所述的轉基因NK細胞或如權利要求6所述的重組基因工程表達載體。
8.如權利要求1-3中任一項所述的制備方法在制備抗腫瘤制劑或腫瘤趨化制劑中的用途。
9.如權利要求4或5所述的轉基因NK細胞或如權利要求6所述的重組基因工程表達載體或如權利要求7所述的試劑盒在殺傷腫瘤細胞或腫瘤趨化中的用途。
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