[發(fā)明專利]一種鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基、制備方法及其應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201910376265.4 | 申請(qǐng)日： | 2019-05-07 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN109988733A | 公開（公告）日： | 2019-07-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 譚美芳;李海琴;曾艷兵;康昭風(fēng);魏岳 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 |
| 主分類號(hào)： | C12N1/20 | 分類號(hào)： | C12N1/20;C12N1/02;C12Q1/14;C12R1/46 |
| 代理公司： | 北京金智普華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11401 | 代理人： | 楊采良 |
| 地址： | 330200 *** | 國省代碼： | 江西;36 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 鏈球菌 固體培養(yǎng)基 萘啶酸 制備 微生物技術(shù)領(lǐng)域 實(shí)驗(yàn)操作過程 胰化酪蛋白胨 酵母提取物 單糖組成 分離純化 篩選鑒定 示蛋白胨 培養(yǎng)基 精氨酸 瓊脂粉 可用 染菌 尿素 應(yīng)用 | ||
1.一種鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基，其特征在于，所述鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基按質(zhì)量/體積比例由示蛋白胨10g/L、胰化酪蛋白胨5g/L、酵母提取物5g/L、瓊脂粉15g/L、KCl 2.5g/L、尿素0.06g/L、精氨酸0.1742g/L、萘啶酸20mg/L及任何質(zhì)量/體積比例的單糖組成。
2.如權(quán)利要求1所述的鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基，其特征在于，所述鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基pH 7.0。
3.如權(quán)利要求1所述的鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基，其特征在于，所述鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基按質(zhì)量/體積比例由示蛋白胨10g/L、胰化酪蛋白胨5g/L、酵母提取物5g/L、瓊脂粉15g/L、KCl 2.5g/L、尿素0.06g/L、精氨酸0.1742g/L、萘啶酸20mg/L及1L的1％葡萄糖組成。
4.如權(quán)利要求1所述的鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基，其特征在于，所述鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基按質(zhì)量/體積比例由示蛋白胨10g/L、胰化酪蛋白胨5g/L、酵母提取物5g/L、瓊脂粉15g/L、KCl 2.5g/L、尿素0.06g/L、精氨酸0.1742g/L、萘啶酸20mg/L及500mL的0.5％蔗糖組成。
5.一種如權(quán)利要求1所述鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基的制備方法包括：
步驟一，稱取萘啶酸粉末，用氫氧化鈉溶液溶解，配制成1000倍儲(chǔ)存液，通過無菌濾膜過濾后分裝到EP管中，-20℃避光密封保存；
步驟二，稱取示蛋白胨、胰化酪蛋白胨、酵母提取物、瓊脂粉和KCl，用雙蒸水溶解，再使用高壓滅菌鍋滅菌，冷卻至50-60℃?zhèn)溆茫?/p>
步驟三，將尿素、精氨酸和單糖按配方用雙蒸水配成混合濃縮溶液，通過無菌濾膜過濾后加入步驟二培養(yǎng)基中；
步驟四，將萘啶酸加入到步驟二培養(yǎng)基中，用無菌HCl溶液將培養(yǎng)基的pH調(diào)節(jié)為7.0；
步驟五，培養(yǎng)基調(diào)節(jié)完pH后，倒無菌平皿，取固體培養(yǎng)基進(jìn)行無菌檢查。
6.如權(quán)利要求5所述的鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，
步驟一進(jìn)一步包括：稱取0.2g萘啶酸粉末，用10mL 0.1M/L的氫氧化鈉溶液溶解，配制成1000倍工作濃度的儲(chǔ)存液，通過0.22μm無菌濾膜過濾后分裝到1.5mL EP管中，-20℃避光密封保存。
7.如權(quán)利要求5所述的鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，
步驟二進(jìn)一步包括：稱取示蛋白胨、胰化酪蛋白胨、酵母提取物、瓊脂粉和KCl，用90:100體積的雙蒸水充分溶解，使用高壓滅菌鍋在121℃條件下滅菌15分鐘，冷卻至50-60℃時(shí)備用。
8.如權(quán)利要求5所述的鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，步驟三進(jìn)一步包括：將尿素、精氨酸和單糖按配方用雙蒸水配成10:100的混合濃縮溶液，通過0.22μm無菌濾膜過濾后加入步驟二培養(yǎng)基中；
9.如權(quán)利要求5所述的鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，
步驟四進(jìn)一步包括：將萘啶酸按1:1000的比例加入到步驟二培養(yǎng)基中，用無菌HCl溶液將培養(yǎng)基的pH調(diào)節(jié)為7.0；
步驟五進(jìn)一步包括：將調(diào)節(jié)完pH的培養(yǎng)基倒無菌平皿；取一塊固體培養(yǎng)基置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)，進(jìn)行無菌檢查。
10.一種如權(quán)利要求1所述鏈球菌特異性固體培養(yǎng)基在鏈球菌的篩選鑒定、分離純化上的應(yīng)用。
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