[發明專利]一種聲控腫瘤高效協同免疫治療可視化微納載體系統及其制備方法、應用

有效

• 申請號: 201910375797.6
• 申請日: 2019-05-07
• 公開（公告）號: CN110115764B
• 公開（公告）日: 2021-10-29
• 發明（設計）人: 常津;王天歌;王漢杰;程國輝;何天地;張英英
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K49/22;A61K9/51;A61K9/00;A61P35/00
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 程小艷

1.一種聲控腫瘤高效協同免疫治療可視化微納載體系統的制備方法，其特征在于：該系統由微環境響應型納米顆粒組成智能模塊，由聲敏蛋白MscL基因組成聲控模塊，由T細胞和DC細胞抗體組成靶向模塊，由微泡負載超聲成像劑組成可視模塊；

最終形成微泡包裹載基因納米顆粒的結構；

微泡粒徑為1-5微米，載基因納米顆粒粒徑為20-100納米；

所述的聲控腫瘤高效協同免疫治療可視化微納載體系統的制備方法，包括如下步驟：

1)制備聚合物聚(二哌啶丙烷-二硫代季銨鹽)：

(1)用無水二氯甲烷配制0.1M二甲胺基丙酸溶液，加入2-3g EDC鹽酸鹽和100-120mg二甲氨基吡啶，氬氣保護，加入4-6g二硫代二乙醇，室溫反應過夜，產物進行硅膠層析色譜純化得到還原敏感單體二硫代季銨鹽分子；

(2)稱取2-6g單體二硫代季銨鹽分子和0.5-1.5g 2-疊氮丙烯酸乙酯，加入4-6mL二哌啶丙烷(TDP)，氬氣保護反應，產物進行透析袋透析純化得到分子量為5000-15000的陽離子聚合物聚(二哌啶丙烷-二硫代季銨鹽)P(TDP-ANSSAN)；

2)制備載基因納米顆粒：

(1)聚合物P(TDP-ANSSAN)與聲敏蛋白MscL基因混合溶于去離子水中，兩者的氮磷比為5:1-50:1，自組裝形成納米顆粒；

(2)加入50-100μg T細胞抗體，得到靶向T細胞的載基因納米顆粒；

(3)加入50-100μg DC細胞抗體，得到靶向DC細胞的載基因納米顆粒；

3)構建聲控腫瘤高效協同免疫治療的可視化微納載體系統：通過復乳化-溶劑揮發法制備負載超聲成像劑的脂質體微泡，加入5-15mL上述載基因納米顆粒溶液，得到包裹載基因納米顆粒的超聲成像微泡。