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[發(fā)明專利]谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和治療動脈粥樣硬化產(chǎn)品中的應(yīng)用有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201910375308.7 申請日: 2019-05-07
公開(公告)號: CN110101850B 公開(公告)日: 2023-03-10
發(fā)明(設(shè)計)人: 李漢卿;劉豐銘;李卓玉;單樹花 申請(專利權(quán))人: 山西大學(xué)
主分類號: A61K38/44 分類號: A61K38/44;A61P9/10;A23L33/185
代理公司: 太原市科瑞達(dá)專利代理有限公司 14101 代理人: 劉寶賢
地址: 030006 山*** 國省代碼: 山西;14
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 谷糠 過氧化物 制備 預(yù)防 治療 動脈粥樣硬化 產(chǎn)品 中的 應(yīng)用
【說明書】:

本發(fā)明公開了谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和治療動脈粥樣硬化產(chǎn)品中的應(yīng)用。實驗證明,谷糠過氧化物酶可以有效調(diào)控人主動脈平滑肌細(xì)胞的表型由合成型向收縮型轉(zhuǎn)變;可以顯著抑制人主動脈平滑肌細(xì)胞遷移;可以顯著抑制人主動脈平滑肌細(xì)胞吞噬脂質(zhì);可以顯著抑制人單核巨噬細(xì)胞吞噬脂質(zhì);可以減少主動脈病變和升高高密度脂蛋白膽固醇,來抑制小鼠體內(nèi)動脈粥樣硬化的發(fā)生;進(jìn)而預(yù)防和治療動脈粥樣硬化。以谷糠過氧化物酶為主要成分可以用來制備預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化的功能食品或藥品等產(chǎn)品。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及谷糠過氧化物酶的新用途,具體涉及谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化藥品中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

動脈粥樣硬化( Atherosclerosis, AS)是引起心腦血管疾病最主要的原因,而全球每年死于心腦血管疾病人數(shù)居于各種死因首位。膽固醇代謝異常、主動脈平滑肌細(xì)胞(HASMC)形態(tài)轉(zhuǎn)變,遷移以及吞噬脂質(zhì);單核巨噬細(xì)胞(THP-1)吞噬脂質(zhì)等是動脈粥樣硬化形成過程中重要因素。目前臨床上對于動脈粥樣硬化的治療主要以他汀類藥品為主,該類藥品副作用較多,因此,從天然產(chǎn)物中開發(fā)預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化藥品等產(chǎn)品尤為重要。

谷子(學(xué)名:Setaria italica)屬一年禾本科黍族狗尾草屬,起源于我國的黃河流域,是華北地區(qū)的主要特產(chǎn)之一。谷子脫殼后即為小米,其脫下的殼就是谷糠。中國專利ZL201210084160.X 公開了一種谷糠抗腫瘤活性蛋白(即谷糠過氧化物酶,命名為:FMBP)及其制備方法,以及該蛋白在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。但將該蛋白用于預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化沒有研究和報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供谷糠過氧化物酶的新用途,具體提供谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化藥品中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供的谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化的藥品中的應(yīng)用,所述谷糠過氧化物酶可按照中國專利 ZL201210084160.X 公開的方法制備得到。

谷糠過氧化物酶的制備步驟:

第一步:取谷糠,粉碎后,加入預(yù)冷的蛋白提取液,4℃下浸泡并攪拌12-16小時,離心后取上清液,即為谷糠蛋白粗提液;所述的蛋白提取液為 20mmol/L Tris-HCl溶液,含0.85%NaCl,1mmol/L PMSF,pH8.0;所述的谷糠和蛋白提取液的重量體積比為1︰4-6,其中重量的單位為g,體積的單位為mL;

第二步:在谷糠蛋白粗提液中加入2-3倍體積的-20℃預(yù)冷的丙酮,沉淀蛋白1-2小時,離心,收集沉淀,在-20℃下放置,使丙酮完全揮發(fā),冷凍干燥,得到谷糠粗蛋白;

第三步:將谷糠粗蛋白用pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液溶解,離心后取上清液,按0℃下硫酸銨溶液飽和度計算表,先加入硫酸銨粉末,達(dá)到30%飽和度,充分?jǐn)嚢枞芙夂螅o置,離心,收集上清液,再向上清液中加入硫酸銨粉末,達(dá)到85%飽和度,充分?jǐn)嚢枞芙夂螅o置,離心,收集沉淀,用pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液溶解、透析、濃縮即得到谷糠過氧化物酶粗蛋白;

第四步:將谷糠過氧化物酶粗蛋白用pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液溶解,過Q陰離子交換層析柱,紫外檢測儀于280nm波長處檢測,收集穿透峰;

第五步:將上述穿透液過SP-陽離子柱交換層析柱,用含0.1mol/L NaCl的pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液洗脫,紫外檢測儀于280nm波長處檢測,收集洗脫峰得到谷糠過氧化物酶。

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