[發(fā)明專利]谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和治療動脈粥樣硬化產(chǎn)品中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910375308.7
• 申請日: 2019-05-07
• 公開（公告）號: CN110101850B
• 公開（公告）日: 2023-03-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李漢卿;劉豐銘;李卓玉;單樹花
• 申請（專利權(quán)）人: 山西大學(xué)
• 主分類號: A61K38/44
• 分類號: A61K38/44;A61P9/10;A23L33/185
• 代理公司: 太原市科瑞達(dá)專利代理有限公司 14101
• 代理人: 劉寶賢

本發(fā)明公開了谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和治療動脈粥樣硬化產(chǎn)品中的應(yīng)用。實驗證明，谷糠過氧化物酶可以有效調(diào)控人主動脈平滑肌細(xì)胞的表型由合成型向收縮型轉(zhuǎn)變；可以顯著抑制人主動脈平滑肌細(xì)胞遷移；可以顯著抑制人主動脈平滑肌細(xì)胞吞噬脂質(zhì)；可以顯著抑制人單核巨噬細(xì)胞吞噬脂質(zhì)；可以減少主動脈病變和升高高密度脂蛋白膽固醇，來抑制小鼠體內(nèi)動脈粥樣硬化的發(fā)生；進(jìn)而預(yù)防和治療動脈粥樣硬化。以谷糠過氧化物酶為主要成分可以用來制備預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化的功能食品或藥品等產(chǎn)品。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及谷糠過氧化物酶的新用途，具體涉及谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化藥品中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

動脈粥樣硬化( Atherosclerosis, AS）是引起心腦血管疾病最主要的原因，而全球每年死于心腦血管疾病人數(shù)居于各種死因首位。膽固醇代謝異常、主動脈平滑肌細(xì)胞(HASMC)形態(tài)轉(zhuǎn)變，遷移以及吞噬脂質(zhì)；單核巨噬細(xì)胞(THP-1)吞噬脂質(zhì)等是動脈粥樣硬化形成過程中重要因素。目前臨床上對于動脈粥樣硬化的治療主要以他汀類藥品為主，該類藥品副作用較多，因此，從天然產(chǎn)物中開發(fā)預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化藥品等產(chǎn)品尤為重要。

谷子（學(xué)名：Setaria italica）屬一年禾本科黍族狗尾草屬，起源于我國的黃河流域，是華北地區(qū)的主要特產(chǎn)之一。谷子脫殼后即為小米，其脫下的殼就是谷糠。中國專利ZL201210084160.X 公開了一種谷糠抗腫瘤活性蛋白（即谷糠過氧化物酶，命名為：FMBP）及其制備方法，以及該蛋白在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。但將該蛋白用于預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化沒有研究和報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供谷糠過氧化物酶的新用途，具體提供谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化藥品中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供的谷糠過氧化物酶在制備預(yù)防和/或治療動脈粥樣硬化的藥品中的應(yīng)用，所述谷糠過氧化物酶可按照中國專利 ZL201210084160.X 公開的方法制備得到。

谷糠過氧化物酶的制備步驟：

第一步：取谷糠，粉碎后，加入預(yù)冷的蛋白提取液，4℃下浸泡并攪拌12-16小時，離心后取上清液，即為谷糠蛋白粗提液；所述的蛋白提取液為 20mmol/L Tris-HCl溶液，含0.85%NaCl，1mmol/L PMSF，pH8.0；所述的谷糠和蛋白提取液的重量體積比為1︰4-6，其中重量的單位為g，體積的單位為mL；

第二步：在谷糠蛋白粗提液中加入2-3倍體積的-20℃預(yù)冷的丙酮，沉淀蛋白1-2小時，離心，收集沉淀，在-20℃下放置，使丙酮完全揮發(fā)，冷凍干燥，得到谷糠粗蛋白；

第三步：將谷糠粗蛋白用pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液溶解，離心后取上清液，按0℃下硫酸銨溶液飽和度計算表，先加入硫酸銨粉末，達(dá)到30%飽和度，充分?jǐn)嚢枞芙夂螅o置，離心，收集上清液，再向上清液中加入硫酸銨粉末，達(dá)到85%飽和度，充分?jǐn)嚢枞芙夂螅o置，離心，收集沉淀，用pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液溶解、透析、濃縮即得到谷糠過氧化物酶粗蛋白；

第四步：將谷糠過氧化物酶粗蛋白用pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液溶解，過Q陰離子交換層析柱，紫外檢測儀于280nm波長處檢測，收集穿透峰；

第五步：將上述穿透液過SP-陽離子柱交換層析柱，用含0.1mol/L NaCl的pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液洗脫，紫外檢測儀于280nm波長處檢測，收集洗脫峰得到谷糠過氧化物酶。