[發明專利]谷糠過氧化物酶在制備預防和治療動脈粥樣硬化產品中的應用

有效

• 申請號: 201910375308.7
• 申請日: 2019-05-07
• 公開（公告）號: CN110101850B
• 公開（公告）日: 2023-03-10
• 發明（設計）人: 李漢卿;劉豐銘;李卓玉;單樹花
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: A61K38/44
• 分類號: A61K38/44;A61P9/10;A23L33/185
• 代理公司: 太原市科瑞達專利代理有限公司 14101
• 代理人: 劉寶賢

1.谷糠過氧化物酶在制備預防和/或治療動脈粥樣硬化藥品中的應用；所述的谷糠過氧化物酶通過包括以下步驟的方法制備得到：

第一步：取谷糠，粉碎后，加入預冷的蛋白提取液，4℃下浸泡并攪拌12-16小時，離心后取上清液，即為谷糠蛋白粗提液；所述的蛋白提取液為 20mmol/L Tris-HCl溶液，含0.85%NaCl，1mmol/L PMSF，pH8.0；所述的谷糠和蛋白提取液的重量體積比為1︰4-6，其中重量的單位為g，體積的單位為mL；

第二步：在谷糠蛋白粗提液中加入2-3倍體積的-20℃預冷的丙酮，沉淀蛋白1-2小時，離心，收集沉淀，在-20℃下放置，使丙酮完全揮發，冷凍干燥，得到谷糠粗蛋白；

第三步：將谷糠粗蛋白用pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液溶解，離心后取上清液，按0℃下硫酸銨溶液飽和度計算表，先加入硫酸銨粉末，達到30%飽和度，充分攪拌溶解后，靜置，離心，收集上清液，再向上清液中加入硫酸銨粉末，達到85%飽和度，充分攪拌溶解后，靜置，離心，收集沉淀，用pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液溶解、透析、濃縮即得到谷糠過氧化物酶粗蛋白；

第四步：將谷糠過氧化物酶粗蛋白用pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液溶解，過Q陰離子交換層析柱，紫外檢測儀于280nm波長處檢測，收集穿透峰；

第五步：將上述穿透液過SP-陽離子柱交換層析柱，用含0.1mol/L NaCl的pH8.0、20mmol/L Tris-HCl緩沖液洗脫，紫外檢測儀于280nm波長處檢測，收集洗脫峰得到谷糠過氧化物酶。

2.如權利要求1所述的谷糠過氧化物酶在制備預防和/或治療動脈粥樣硬化藥品中的應用，其特征在于，所述的藥品是將谷糠過氧化物酶添加一種或多種藥學上可接受的輔料制成。