[發(fā)明專利]一種腫瘤相關(guān)基因突變位點(diǎn)篩查方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910364296.8
• 申請日: 2019-04-30
• 公開（公告）號(hào): CN110396543A
• 公開（公告）日: 2019-11-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳翀;劉華勇;胡洋
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州普世利華科技有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/113
• 代理公司: 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 單香杰

1.一組基于CRISPR/Cas12a檢測腫瘤相關(guān)基因突變位點(diǎn)的gRNA組合，其特征在于，所述gRNA組合包括SEQ ID NO.36-71任一或任幾個(gè)所示gRNA。

2.一種基于CRISPR/Cas12a的腫瘤相關(guān)基因突變位點(diǎn)檢測試劑盒，其特征在于，包括Cas12a蛋白和gRNA，所述gRNA為SEQ ID NO.36-71任一或任幾個(gè)所示的gRNA。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述檢測試劑盒，其特征在于，所述Cas12a蛋白為LbCas12a、SsCas12a、ScCas12a、FnCas12a或AsCas12a。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述檢測試劑盒，其特征在于，還包括非特異單鏈DNA熒光探針、RNase抑制劑和核酸酶檢測緩沖液。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述檢測試劑盒，其特征在于，檢測體系包括：不同量的DNA或RPA產(chǎn)物，45nM Cas12a，22.5nM gRNA，100nM在Cas12a切割時(shí)可發(fā)出熒光的報(bào)告DNA鏈，0.5μlRNase抑制劑，及核酸酶檢測緩沖液。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述檢測試劑盒，其特征在于，檢測程序?yàn)椋涸?7℃下反應(yīng)1.5小時(shí)，熒光動(dòng)力檢測5分鐘一次。