[發明專利]一種快速檢測納米顆粒表面配體含量的方法

有效

• 申請號: 201910363510.8
• 申請日: 2019-04-30
• 公開（公告）號: CN110082419B
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 曹成喜;張強;劉偉文;李國慶;劉小平
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: G01N27/447
• 分類號: G01N27/447
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 顧艷哲

本發明涉及一種快速檢測納米顆粒表面配體含量的方法，該方法為：設置不含樣品的對照組和含待檢納米顆粒的檢測組，進行電泳滴定，測定相同時間內對照組和檢測組的界面遷移距離，根據界面遷移距離的差值計算檢測組的納米顆粒表面配體含量。與現有技術相比，本發明具有操作流程簡便、耗時短、具有可視化且不需要依賴昂貴儀器的優點。

技術領域

本發明涉及分析化學技術領域，具體涉及一種快速檢測納米顆粒表面配體含量的方法。

背景技術

納米顆粒(NPs)表面具有很高的比表面積，并能與不同的配體結合。這些配體的存在能夠改變NPs在不同溶液中的溶解度、特異性、對不同物質的吸附能力、表面電荷數、電化學活性等，尤其是NPs通過結合不同的大分子能夠實現可調的生物活性功能。對吸附在NPs上的配體進行定量分析，可以幫助我們了解配體交換反應，在許多應用中，如化學檢測，結合生物靶標和載流子通常都是必要的。

NPs的配體含量檢測仍然存在很大的挑戰，通常有元素分析(J.Aldana,Y.A.Wang,X.Peng,JACS.2001,123,8844-8850.,J.Aldana,N.Lavelle,Y.Wang,X.Peng,JACS.2005；127,2496-2504.)和光學方法(G.Kalyuzhny,R.W.Murray,J.PHYS.CHEM.B.2005,109,7012-7021.,K.E.Knowles,D.B.Tice,E.A.McArthur,G.C.Solomon,E.A Weiss.JACS.2009；132,1041-1050.,A.M.Munro,I.Jen-La Plante,M.S.Ng,D.S.Ginger.J.PHYS.CHEM.C.2007；111,6220-6227.)等方法用于具有電化學活性或核磁共振信號的配體計數，但這些方法存在需要使用復雜的內標，樣品預處理費時和依賴昂貴儀器等問題。

與蛋白質類似的羧酸和胺基是包覆在NPs表面配體的基本基團，酸堿中和反應是一種定量快速的化學反應，能正確地快速檢測含有酸性或堿性基團的NPs的配體覆蓋率。為了快速定量乳制品中蛋白質含量，基于移動反應界面(MRB)發展了電泳滴定技術和裝置(H.Y.Wang,C.Y.Guo,C.G.Guo,L.Y.Fan,L.Zhang,C.X.Cao,Anal.Chim.Acta,2013,774,92-99；H.Y.Wang,J.Yang,J.Y.Dong,W.Zhang,L.Y.Fan,W.B.Zhang,C.X.Cao,ChineseJ.Anal.Chem.,2012,40,968-972等)，申請了蛋白含量電泳滴定檢測相關專利(用于測定酸堿濃度的電遷移酸堿滴定裝置，中國發明專利，2011年，申請號：CN201010596012.7；一種用于測定蛋白質總濃度的可視化生物傳感器裝置，中國發明專利，2012年，申請號：CN201210142985.2；基于移動反應界面電泳的高通量蛋白質滴定方法，中國發明專利，2013年，申請號：CN201310089084.6；防滲漏電泳滴定電極液流動排氣裝置及其使用方法，中國發明專利，2014年，申請號：CN201410478864.4等)。此外，為了進一步減少檢測樣品消耗、縮短檢測時間發展了蛋白電泳芯片滴定技術(H.Y.Wang,Y.T.Shi,J.Yan,J.Y.Dong,S.Li,H.Xiao,H.Y.Xie,L.Y.Fan,C.X.Cao,Anal.Chem.,2014,86,2888-2894；L.X.Zhang,Y.R.Cao,H.Xiao,X.P.Liu,S.R.Liu,Q.H.Meng,L.Y.Fan,C.X.Cao,Biosens.Bioelectron.,2016,77,284-291)，并申請了芯片電泳滴定相關專利(一種定性、定量一體化檢測乳品摻次的方法，中國發明專利，2015年，申請號：CN201510542254.0；定量測定乳品摻次程度的電泳滴定方法，中國發明專利，2015年，申請號：CN201510140100.9)。雖然電泳滴定技術在蛋白含量檢測方面已經有很好的應用，但是在納米顆粒表面配體含量測定方面的應用還是空白，尤其是不依賴內標實現對配體含量的絕對定量檢測和分析仍有困難。

發明內容