[發明專利]一種雞哥倫比亞羽基因型的檢測引物、檢測試劑盒、檢測方法及應用

有效

• 申請號: 201910362444.2
• 申請日: 2019-04-30
• 公開（公告）號: CN111850132B
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 康相濤;李轉見;田亞東;劉丹麗;韓瑞麗;孫桂榮;王鑫磊;王永才;李國喜;閆峰賓;蔣瑞瑞;李紅;李文婷;劉小軍;王彥彬
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 牛愛周

本發明涉及一種雞哥倫比亞羽基因型的檢測引物、檢測試劑盒、檢測方法及應用，屬于動物遺傳育種技術領域。本發明中發現RAI14基因上游區域序列中第33?95位63bp堿基序列的插入與雞哥倫比亞羽性狀具有密切的聯系，因此本發明中利用RAI14基因上游區域的的特點，建立了針對該插入的PCR基因分型方法，進而可以對哥倫比亞羽雞基因進行分型。本發明所提供的雞哥倫比亞羽基因型的檢測方法操作簡單、檢測快速、結果準確，有利于在育種實踐中更有效、快速地對哥倫比亞羽性狀進行選擇，加快育種進展，節約育種成本，為哥倫比亞羽雞性狀的選育提供快捷的分子選育方法。

技術領域

本發明涉及一種雞哥倫比亞羽基因型的檢測引物、檢測試劑盒、檢測方法及應用，屬于動物遺傳育種技術領域。

背景技術

雞的羽色十分豐富，是雞的重要品種特征之一，也是雞育種工作中一項重要選擇指標。雞的淺蘆花羽也叫哥倫比亞羽，具體表現為：羽毛外觀主體基本為白羽，頸部、翼部和尾部的羽毛末端有黑色橫斑呈橫斑淺蘆花狀，其為性連鎖哥倫比亞羽。伴性哥倫比亞羽由于其特點鮮明，伴性遺傳，獲得了更多的關注和研究。

哥倫比亞羽作為一種性狀，表現在豫粉1號H系中，國外具有哥倫比亞色洛克雞。2004年開始，連續2年利用引進的巴布考克B-380祖代C系公雞的混合精液，與固始雞原始群體中哥倫比亞母雞進行級進雜交，從中選出哥倫比亞羽的公母雞，然后進行橫交固定，閉鎖繁育，獲得豫粉1號雞。自2008年開始又分快羽、慢羽進行家系選育，其中H系為快羽系、N系為慢羽系。雞的羽色為質量性狀，受眾多基因控制，其遺傳也是一個復雜的過程，目前沒有較好的檢測雞哥倫比亞羽基因型的方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種雞哥倫比亞羽基因型的檢測引物，能夠較好的檢測雞的哥倫比亞羽基因型。

本發明還提供了雞哥倫比亞羽基因型的檢測試劑盒，能夠用于檢測雞的哥倫比亞羽基因型。

本發明還提供了雞哥倫比亞羽基因型的檢測方法，能夠檢測出雞的哥倫比亞羽基因型。

本發明還提供了上述雞哥倫比亞羽基因型的檢測方法的應用，為雞哥倫比亞羽品種的育種提供了一種新方法。

為了實現上述目的，本發明所采用的技術方案是：

一種雞哥倫比亞羽基因型的檢測引物，所述檢測引物的PCR擴增序列覆蓋如SEQID NO.1所示序列的第33-95位。

如SEQ ID NO.1所示序列為RAI14基因上游區域序列，RAI14基因全稱為維甲酸誘導蛋白14基因，是首先在肝臟中鑒定的肌動蛋白結合蛋白。在人體內，RAI14基因在外質特化中發揮肌動蛋白調節作用，對于精子極性的建立和正常精子細胞的粘附極其重要，也可能促進血睪屏障的Sertoli細胞緊密連接的完整性；在雞體內，RAI14基因位于Z染色體上，有2個轉錄物(剪接變體)。本發明中發現RAI14基因上游區域序列第33-95位63bp堿基序列的插入與雞哥倫比亞羽性狀具有密切的聯系，屬于雞伴性哥倫比亞羽基因，因此本發明中利用RAI14基因上游區域的63bp堿基序列插入的特點，建立了針對該插入的PCR基因分型方法，進而可以對哥倫比亞羽雞基因進行分型。

優選的，所述檢測引物的核苷酸序列如下所示：

上游引物P-F：5′-CGTATACACAGCCTGGCCTAA-3′(如SEQ ID NO.3所示)；

下游引物P-R：5′-ATTCCTGTGTGTGGTGGAGTG-3′(如SEQ ID NO.4所示)。

上述引物擴增片段的大小分別為257bp或者194bp，257bp為63bp堿基序列插入，為Z^H型；194bp為63bp堿基序列缺失，為Z^h型。