[發明專利]一種雞哥倫比亞羽基因型的檢測引物、檢測試劑盒、檢測方法及應用

有效

• 申請號: 201910362444.2
• 申請日: 2019-04-30
• 公開（公告）號: CN111850132B
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 康相濤;李轉見;田亞東;劉丹麗;韓瑞麗;孫桂榮;王鑫磊;王永才;李國喜;閆峰賓;蔣瑞瑞;李紅;李文婷;劉小軍;王彥彬
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 牛愛周

1.一種雞哥倫比亞羽基因型的檢測引物，其特征在于：所述檢測引物的PCR擴增序列覆蓋如SEQ ID NO.1所示序列的第33-95位；所述PCR擴增序列的大小分為257bp或者194bp，257bp為63bp堿基序列插入，為Z^H型，如SEQ ID NO.1所示序列；194bp為63bp堿基序列缺失，為Z^h型，如SEQ ID NO.2所示序列。

2.根據權利要求1所述的雞哥倫比亞羽基因型的檢測引物，其特征在于：所述檢測引物的核苷酸序列如下所示：

上游引物P-F：5′- CGTATACACAGCCTGGCCTAA -3′；

下游引物P-R：5′- ATTCCTGTGTGTGGTGGAGTG -3′。

3.一種雞哥倫比亞羽基因型的檢測試劑盒，其特征在于：所述檢測試劑盒中包含檢測引物，所述檢測引物的PCR擴增序列覆蓋如SEQ ID NO.1所示序列的第33-95位；所述PCR擴增序列的大小分為257bp或者194bp，257bp為63bp堿基序列插入，為Z^H型，如SEQ ID NO.1所示序列；194bp為63bp堿基序列缺失，為Z^h型，如SEQ ID NO.2所示序列。

4.根據權利要求3所述的雞哥倫比亞羽基因型的檢測試劑盒，其特征在于：所述檢測引物的核苷酸序列如下所示：

上游引物P-F：5′- CGTATACACAGCCTGGCCTAA -3′；

下游引物P-R：5′- ATTCCTGTGTGTGGTGGAGTG -3′。

5.根據權利要求3所述的雞哥倫比亞羽基因型的檢測試劑盒，其特征在于：還包括2×Taq PCR masterMix。

6.一種雞哥倫比亞羽基因型的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）以待測雞的基因組DNA為模板，用檢測引物進行PCR擴增，得到PCR擴增產物；所述檢測引物的PCR擴增序列覆蓋如SEQ ID NO.1所示序列的第33-95位；所述PCR擴增序列的大小分為257bp或者194bp，257bp為63bp堿基序列插入，為Z^H型，如SEQ ID NO.1所示序列；194bp為63bp堿基序列缺失，為Z^h型，如SEQ ID NO.2所示序列；

2）對PCR擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，根據電泳檢測結果鑒定雞哥倫比亞羽的基因型。

7.根據權利要求6所述的雞哥倫比亞羽基因型的檢測方法，其特征在于：所述基因型為哥倫比亞羽基因型、非哥倫比亞羽基因型；所述哥倫比亞羽基因型為Z^HZ^H、Z^HW或Z^HZ^h基因型；非哥倫比亞羽基因型為Z^hZ^h或Z^hW基因型。

8.根據權利要求7所述的雞哥倫比亞羽基因型的檢測方法，其特征在于：所述檢測引物的核苷酸序列如下所示：

上游引物P-F：5′- CGTATACACAGCCTGGCCTAA -3′；

下游引物P-R：5′- ATTCCTGTGTGTGGTGGAGTG -3′。

9.如權利要求6所述的雞哥倫比亞羽基因型的檢測方法在雞育種方面的應用。