[發明專利]II型草魚呼腸孤病毒的微滴式數字PCR檢測試劑盒及其專用引物和探針在審
| 申請號： | 201910361643.1 | 申請日： | 2019-04-30 |
| 公開（公告）號： | CN109971890A | 公開（公告）日： | 2019-07-05 |
| 發明（設計）人： | 王浩;唐睿哲;聞金萱 | 申請（專利權）人： | 上海海洋大學 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227 | 代理人： | 周一新 |
| 地址： | 201306 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 專用引物 探針 呼腸孤病毒 檢測試劑 數字PCR 草魚 微滴 淬滅基團 內參基因 熒光基團 傳統PCR 靶分子 單拷貝 檢測 | ||
【權利要求書】：
1.II型草魚呼腸孤病毒的微滴式數字PCR專用引物和探針，其特征在于，所述專用引物和探針如下：
JX02-M-F：5'-CGAGAATAGATGCAGTGGACG-3'，
JX02-M-R：5'-CACAAATAACCCTTCTCCCGT-3'，
JX02-M-P：5'-熒光基團-TATAGTCGATGACCAGAGG-淬滅基團-3'；
其中，所述熒光基團為VIC，所述淬滅基團為BHQ-X。
2.II型草魚呼腸孤病毒的微滴式數字PCR檢測試劑盒，其特征在于，包含權利要求1所述的微滴式數字PCR專用引物和探針，還包括陽性對照和陰性對照。
3.根據權利要求2所述的II型草魚呼腸孤病毒的微滴式數字PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述陽性對照為II型草魚呼腸孤病毒cDNA模板，所述陰性對照為無菌ddH2O。
4.權利要求2或3所述的II型草魚呼腸孤病毒的微滴式數字PCR檢測試劑盒用于檢測II型草魚呼腸孤病毒的方法，其特征在于，包括：
(1)獲取如上所述的微滴式數字PCR專用引物和探針；
(2)提取待測樣本、陽性對照和陰性對照的RNA并反轉錄；
(3)將步驟(2)所得RNA進行微滴式數字PCR擴增，獲得反應液；
(4)對步驟(3)所得反應液進行微滴熒光信號分析掃描。
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