[發(fā)明專利]含STn或F-STn的糖綴合物及其制備方法和在抗腫瘤疫苗中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910354490.8
• 申請日: 2019-04-29
• 公開（公告）號: CN110064050B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 葉新山;宋成程;鄭秀靜;李勤
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大學
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K39/385;A61K47/64;A61K47/61;A61K47/54;A61P35/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 趙曉琳

本發(fā)明提供了含STn或F?STn的糖綴合物及其制備方法和在制備抗腫瘤疫苗中的應(yīng)用，屬于糖類綴合物技術(shù)領(lǐng)域。含STn或F?STn的糖綴合物，所述糖綴合物包括STn或F?STn和載體；所述STn或F?STn通過連接鍵與載體偶聯(lián)；所述連接鍵包括酰胺鍵、肟鍵或C?N鍵；所述載體包括蛋白質(zhì)、兩性離子多糖、脂質(zhì)或核酸。所述糖綴合物在制備抗腫瘤或癌癥的疫苗或制備提高細胞和/或體液免疫應(yīng)答的藥物中的應(yīng)用。F?STn的糖蛋白綴合物制備的疫苗能夠提高體液免疫和細胞免疫應(yīng)答，且產(chǎn)生的抗體能夠有效地識別STn陽性腫瘤細胞，并且通過ADCC及CDC途徑裂解STn陽性腫瘤細胞。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于糖類綴合物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及含STn或F-STn的糖綴合物及其制備方法和在抗腫瘤疫苗中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

近年來，基于糖抗原的抗腫瘤疫苗成為一個研究的熱點(Keding,S.Carbohydratevaccines.Chem.Eng.News.2004,82,31-35.)。其中抗原STn是一個含有唾液酸的二糖結(jié)構(gòu)，在人類肺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌等多有表達，而在正常組織中表達極少(Holmberg,L.ExpertRev.Vaccines 2004,3,655-663.)，因而成為腫瘤免疫治療的重要靶點。

Biomira公司將天然STn抗原與載體鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)結(jié)合構(gòu)建用于預防結(jié)直腸癌和乳腺癌轉(zhuǎn)移的疫苗STn-KLH然而，III期臨床試驗的結(jié)果表明，未能減少疾病進展時間并增加總生存率(Miles,D.Oncologist.2011,16,1092-1100)。當患者接受與激素聯(lián)合治療時，臨床療效不明顯(Ibrahim,N.K.J.Cancer.2013,4,577-584)。其中一個可能的原因是STn免疫原性不足，不能在體內(nèi)產(chǎn)生滿意的免疫應(yīng)答。

目前對于基于腫瘤相關(guān)糖抗原設(shè)計的抗腫瘤糖疫苗，主要通過以下策略提高疫苗的免疫應(yīng)答，分別是：1)用佐劑來輔助，延長免疫反應(yīng)時間及增強免疫應(yīng)答水平(Bonam,S.R.Trends Pharmacol.Sci.2017,38,771-793)；2)通過與免疫原性載體結(jié)合誘導T細胞依賴的免疫反應(yīng)(Astronomo,R.D.Nat.Rev.Drug Discovery.2010,9,308-324)；3)簇狀抗原模擬腫瘤細胞表面的糖抗原結(jié)構(gòu)，促進B細胞表面受體交聯(lián)(Richichi,B.Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.2014,53,11917-11920)。盡管在這一領(lǐng)域已經(jīng)取得了進展，但迄今為止還沒有一種以腫瘤相關(guān)糖抗原為基礎(chǔ)的疫苗獲得FDA的批準。因此，提高糖抗原的免疫原性仍有很大的需求。

改良腫瘤相關(guān)糖抗原結(jié)構(gòu)以提高疫苗免疫原性的概念最早由Jennings于1986年提出(Jennings,H.J.J.Immunol 986,137,1708–1713)。影響這一策略的主要因素之一是結(jié)構(gòu)修飾糖抗原的抗體與天然抗原的親和力。研究發(fā)現(xiàn)對STn進行適當?shù)慕Y(jié)構(gòu)修飾能夠提高免疫原性，其中N-丙酰STn所產(chǎn)生的抗體是STn-KLH的兩倍(Sahabuddin,S.Tetrahedron.2010,66,7510-7519)，N-丙酰triSTn疫苗誘導的抗triSTn的IgG抗體能有效識別表達STn簇的癌細胞(Chang,T.C.Angew.Chem.,Int.Ed.Engl.2018,57,8219-8224)。目前發(fā)現(xiàn)F-STn-KLH(兩個乙酰基被氟乙酰基取代)與STn-KLH相比，可以有效抑制腫瘤的生長，顯著延長荷瘤小鼠的生存時間。F-STn-KLH疫苗較強的抗腫瘤活性主要體現(xiàn)在細胞和體液免疫應(yīng)答的增加(Song,C.Oncotarget.2017,8,47330-47343)。但是載體蛋白KLH是一種具有高糖基化的大型異質(zhì)蛋白復合物，KLH蛋白的復雜性導致其制備的重復性差，限制了其臨床應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種具有較高免疫活性的含STn或F-STn的糖綴合物及其制備方法和在抗腫瘤疫苗中的應(yīng)用。