[發明專利]一種靶向標記MMP-2的磁共振分子探針的構建方法在審
| 申請號： | 201910344346.6 | 申請日： | 2019-04-26 |
| 公開（公告）號： | CN110064061A | 公開（公告）日： | 2019-07-30 |
| 發明（設計）人： | 鐘士江;單煜恒;張哲 | 申請（專利權）人： | 鐘士江 |
| 主分類號： | A61K49/18 | 分類號： | A61K49/18 |
| 代理公司： | 北京盛凡智榮知識產權代理有限公司 11616 | 代理人： | 高志軍 |
| 地址： | 300300 天津市東麗區成*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 磁共振 分子探針 靶向 構建 基質金屬蛋白酶 超順磁氧化鐵 膠質瘤細胞 神經膠質瘤 生物相容性 碳二亞胺法 診斷 分子成像 靜脈給藥 納米顆粒 腦膠質瘤 新型分子 主動靶向 弛豫率 磁飽和 陰性 分級 抗體 探針 定性 合成 | ||
1.一種靶向標記MMP-2的磁共振分子探針的構建方法，其特征在于：所述MRI診斷神經膠質瘤的新型分子探針由超順磁氧化鐵納米顆粒(superparamagneticironoxidenanoparticles，USPIO)和基質金屬蛋白酶-2抗體(MMP2Ab)通碳二亞胺法合成。
2.根據權利要求1所述的一種靶向標記MMP-2的磁共振分子探針的構建方法，其特征在于：高溫分解法合成USPIO-PEG超順磁氧化鐵納米顆粒：
1.稱取15gPEG加入50ml三口圓底燒瓶中；
2.200ml/min的氬氣環境下，磁力攪拌10min勻速升溫至80℃；
3.加入0.7g乙酰丙酮鐵后保溫10分鐘，然后以7.2℃/min，25min內升溫至260℃，保溫1h，停止加熱，自然冷卻至60℃左右；
4.所得產物用60ml甲苯超聲清洗，并置于磁鐵上吸附，使用甲苯、丙酮依次超聲清洗取下層黑色沉淀即為USPIO-PEG。
3.根據權利要求1所述的一種靶向標記MMP-2的磁共振分子探針的構建方法，其特征在于：合成USPIO-PEG-MMP2Ab探針
1.取USPIO-PEG(1mgFe，3.5mg/ml)加入2mLEP管中；
2.稱取0.5mgEDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)及1.4mgN-羥基硫代琥珀酰亞胺(sulfo-NHS)，加入100μl去離子水溶解后，迅速轉移至USPIO溶液中，室溫下反應15min；
3.采用PD-10交換柱對活化后的USPIO進行緩沖液交換，洗脫液采用NaHCO3(0.1M)，然后加入0.5mgMMP2Ab在室溫下進行偶聯反應，4h后，采用PBS緩沖液進行透析過夜；
4.偶聯完畢后，將偶聯物置于4℃冰箱儲存備用，使用前用無菌PBS洗2次，1次5min。
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