[發(fā)明專利]一種彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910342854.0 | 申請日： | 2019-04-26 |
| 公開（公告）號： | CN110044988B | 公開（公告）日： | 2021-01-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王建浩;邱琳;崔朋飛;周舒文;朱志蘭;柳麗;劉曉騫 | 申請（專利權(quán)）人： | 常州大學(xué) |
| 主分類號： | G01N27/327 | 分類號： | G01N27/327;G01N27/447;G01N21/64 |
| 代理公司： | 常州市英諾創(chuàng)信專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32258 | 代理人： | 謝新萍 |
| 地址： | 213164 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 彎曲 毛細管 電泳 檢測 方法 | ||
1.一種彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法，其特征在于：將量子點與多肽結(jié)合形成雙酶探針，再將電泳所用的毛細管分別彎曲成不同個數(shù)的半圓，固定后，先進樣雙酶探針，間隔10s后進樣水解酶，經(jīng)熒光光譜儀檢測雙酶探針的熒光強度；所述的彎曲毛細管為石英毛細管；
所述多肽含有(1)雙酶切位點；(2)用于和量子點發(fā)生FRET的熒光染料Cy5；(3)和量子點結(jié)合的6×組氨酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法，其特征在于：所述的水解酶為PreScission蛋白酶和凝血酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法，其特征在于：所述多肽含有的雙酶切位點為LEVLFQGP和LVPRGS。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法，其特征在于：所述多肽序列為Cy5-D3LEVLFQGPGLVPRGSGP9G2H6。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法，其特征在于：所述量子點為含有Zn的量子點，CdSe/ZnS、CdTe/ZnS、CdSe/ZnSe或CdTe/ZnSe。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法，其特征在于：所述的雙酶探針為1μM量子點與8μM多肽等體積混合孵育10min得到。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法，其特征在于：所述的彎曲毛細管的內(nèi)徑為75μm，外徑為365μm，彎曲的半圓個數(shù)為1-4個，彎曲的直徑為3cm。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法，其特征在于，所述的彎曲毛細管為180°等寬圓弧彎曲毛細管。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的彎曲毛細管電泳檢測多酶的方法，其特征在于，所述雙酶探針的進樣時間為15s，所述水解酶的進樣時間為15s，所述的水解酶進樣間隔為10s。
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