[發明專利]一種生物制劑中宿主殘留rDNA的去除方法在審
| 申請號： | 201910341738.7 | 申請日： | 2019-04-25 |
| 公開（公告）號： | CN111849962A | 公開（公告）日： | 2020-10-30 |
| 發明（設計）人： | 楊宏宇;王海燕;張廣民;蔡輝益 | 申請（專利權）人： | 北京挑戰農業科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京華仁聯合知識產權代理有限公司 11588 | 代理人： | 蘇雪雪 |
| 地址： | 100081 北京市海淀區中關*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 生物制劑 宿主 殘留 rdna 去除 方法 | ||
1.一種基因工程菌生產的生物制品中rDNA去除方法，其特征在于，步驟為：
(1)將產目的物的發酵菌株培養至一定階段，提取并檢測發酵液中rDNA含量；
(2)利用板框過濾、微濾膜除菌進行固液分離；
(3)在發酵液上清中添加絮凝劑，并根據發酵產物的耐熱穩定性將溫度控制在50-70℃之間；
(4)利用微濾膜對步驟(3)獲得的發酵液進行二次過濾，之后利用超濾膜進行濃縮；
(5)在步驟(4)獲得的濃縮液中添加魚精蛋白，低速攪拌后利用超濾膜除雜；
(6)在超濾膜透過液中添加核酸酶，過夜水解。
(7)利用噴霧干燥塔對步驟(6)獲得的水解液進行干燥。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述絮凝劑添加比例為0.01％-2％，絮凝劑可以是堿式氯化鋁或聚合硫酸鐵，所述超濾膜為30kDa超濾膜。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述濃縮體積需在5～10倍。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述濃縮體積為10倍。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(5)魚精蛋白添加比例為0.05-1％，低速攪拌3-10h后利用50-100kDa的超濾膜除雜，所述步驟(6)核酸酶添加比例為0.01-1％過夜水解溫度為30-60℃。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，魚精蛋白的添加量為0.5％。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述干燥溫度設定在140-190℃。
8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述發酵工程菌包括釀酒酵母、畢赤酵母、黑曲霉在內的真核菌屬，也包括芽孢桿菌屬、腸球菌屬、梭菌屬在內的原核菌屬，所述酶制劑包括植酸酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶、酸性蛋白酶、淀粉酶在內的工業酶制劑，也包括利用發酵法生產的氨基酸、維生素等其它生物制品。
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