[發明專利]一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒及其檢測方法

在審

• 申請號: 201910339358.X
• 申請日: 2019-04-25
• 公開（公告）號: CN109929735A
• 公開（公告）日: 2019-06-25
• 發明（設計）人: 陳柱;何農躍;李松;周楓林;鄧燕;趙澤湘;牟賢波
• 申請（專利權）人: 湖南工業大學
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12N15/10;C12Q1/6813;C12Q1/6844
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 楊千尋;馮振寧

本發明公開了一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒及其檢測方法。所述一體化卡盒包括反應室組、試劑室組、均液室組、檢測室組和活動柱塞，反應室組與試劑室組、廢液室和均液室組通過管道連接，均液室組與檢測室組通過管道對應連接，所述反應室組與試劑室組和均液室組間均設有閥門。本發明所述柱塞式核酸檢測一體化卡盒是一個全封閉體系，能夠在卡盒中完成病菌檢測的整個過程，包括核酸提取、擴增/雜交和檢測，能夠保證被測樣品不會混淆，同時不會造成氣溶膠污染，減小檢測人員被病菌感染的機率。本發明還可通過處理器程序設定對外部動力控制實現自動化檢測，具有很強的實用性。

技術領域

本發明涉及醫療器械技術領域，更具體地，涉及一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒及其檢測方法。

背景技術

目前，致病菌檢測主要方法有培養法、免疫分析法和核酸法。

培養法是將不同的細菌培養在不同的培養基，大多非可培養狀態菌無法通過培養被檢測；不同菌體可能產生相同的特異性物質，產生假陽性菌落。免疫分析法是利用抗原-抗體反應的特異性對目標物質進行檢測的方法，包括酶免疫技術、熒光免疫技術和免疫磁分離技術等。這兩種方法的操作過程時間長，對外界環境要求高，檢測結果可靠性不強。

核酸法是應用分子生物學方法，檢測致病菌遺傳物質結構或表達水平的變化，繼而作出診斷的技術。核酸的檢測過程包括樣本前處理與純化、核酸擴增/雜交與檢測等。在檢測過程中，傳統的檢測方法人為操作過程復雜，自動化程度不高，樣本檢測時容易出現交叉污染、結果出現假陽性等一系列問題，并且檢測實驗的開放環境容易增加工作人員感染病菌的機率。

發明內容

本發明要解決的技術問題是針對現有技術中檢測效率低、準確度不高、易用性不強的不足，提供一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒。

本發明另一技術問題是根據柱塞式核酸檢測一體化卡盒提供其檢測方法。

本發明的目的通過以下技術方案予以實現：

一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，包括反應室組、試劑室組、檢測室組和活動柱塞，所述反應室組、試劑室組、檢測室組為卡盒內置的中空腔體，腔體的開口在卡盒表面，所述活動柱塞與反應室組、試劑室組和檢測室組的腔體相匹配，活動柱塞可借助外部動力在腔體內上拉或下推。所述反應室組與試劑室組通過管道連接，反應室組與檢測室組通過管道連接。所述反應室與試劑室組、反應室組和檢測室組間設有閥門。

進一步地，反應室組和檢測室組之間還設有均液室組，均液室底部有管道與檢測室對應連接，連接管道設有流體雙向閥門或流體單向閥門。優選地，所述均液室組內的均液室位于同一平面，均液室之間由相同高度的管道連接，有效的保證檢測室內的溶液均分，減小檢測誤差。進一步優選地，所述均液室之間設有閥門。

進一步地，所述反應室組至少包括1個反應室，所述試劑室組至少包括1個試劑室，所述均液室組至少包括2個均液室，所述檢測組至少包括2個檢測室。反應室組可滿足核酸提取不同物質反應分開提純，均液室組和檢測室組一一對應連接。優選地，根據試驗檢測要求，3組檢測可定性分析，5組檢測可定量或多重分析。

進一步地，所述反應室組底部設有磁鐵和加熱器，所述檢測室組底部設有變溫器。所述磁鐵可將磁性物質吸附在反應室底部，可以與目標物質吸附或反應，也可以防止磁性物質流失或對檢測造成影響。加熱器和變溫器可對反應和檢測的溫度進行調整。

進一步地，所述連接反應室的管道連接處設有流體雙向閥門，試劑室組管道連接口設有流體雙向閥門，試劑室內的試劑壓入反應室反應，反應后可壓會原溶劑儲存室。

進一步地，所述柱塞式核酸檢測一體化卡盒還包括廢液室，所述廢液室與反應室組通過管道連接，所述廢液室與反應室組之間設有流體單向閥門。溶劑室內溶劑單向進入反應室，反應完后廢液直接排進廢液室，可保證原溶劑室內的純度，可多次使用。