[發明專利]一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒及其檢測方法

在審

• 申請號: 201910339358.X
• 申請日: 2019-04-25
• 公開（公告）號: CN109929735A
• 公開（公告）日: 2019-06-25
• 發明（設計）人: 陳柱;何農躍;李松;周楓林;鄧燕;趙澤湘;牟賢波
• 申請（專利權）人: 湖南工業大學
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12N15/10;C12Q1/6813;C12Q1/6844
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 楊千尋;馮振寧

1.一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，包括反應室組、試劑室組、檢測室組和活動柱塞，所述反應室組、試劑室組、檢測室組為卡盒內置的中空腔體，腔體的開口在卡盒表面，所述活動柱塞與反應室組、試劑室組和檢測室組的腔體相匹配，活動柱塞可借助外部動力在腔體內上拉或下推；所述反應室組與試劑室組通過管道連接，反應室組與檢測室組通過管道連接；所述反應室與試劑室組、反應室組和檢測室組間設有閥門。

2.根據權利要求1所述一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，反應室組和檢測室組之間還設有均液室組，均液室組為中空腔體，有活動柱塞與其相匹配，均液室底部有管道與檢測室對應連接，連接管道設有流體雙向閥門或流體單向閥門；所述均液室組內的均液室位于同一平面，均液室之間由相同高度的管道連接；所述均液室之間設有閥門。

3.根據權利要求1或2所述一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，所述反應室組至少包括1個反應室；所述試劑室組至少包括1個試劑室；所述均液室組至少包括2個均液室；所述檢測組至少包括2個檢測室。

4.根據權利要求3所述一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，所述反應室組底部設有磁鐵和加熱器；所述檢測室組底部設有變溫器。

5.根據權利要求1所述一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，所述連接反應室的管道連接處設有流體雙向閥門；所述試劑室組管道連接口設有流體雙向閥門或流體單向閥門。

6.根據權利要求1所述一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，所述外部動力由電機、氣泵、液泵的一種或多種方式提供。

7.根據權利要求1所述一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，所述柱塞式核酸檢測一體化卡盒還設有檢測孔，所述檢測孔可以對檢測室內的溶劑采用對射、散射、反射的一種或多種檢測；所述檢測方法為熒光檢測、紫外線檢測、濁度檢測的一種或多種。

8.根據權利要求1所述一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，所述柱塞式核酸檢測一體化卡盒還包括廢液室，所述廢液室與反應室組通過管道連接；所述廢液室與反應室組之間設有流體單向閥門或流體雙向閥門。

9.根據權利要求1~8任一所述一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，所述柱塞式檢測一體化卡盒可用于分子的純化和檢測一種或多種；所述柱塞式檢測一體化卡盒可用于核酸的提純、擴增、雜交和檢測的一種或多種；所述柱塞式檢測一體化卡盒也可用于蛋白質純化和檢測的一種或多種。

10.根據權利要求1-9任一所述一種柱塞式核酸檢測一體化卡盒，其特征在于，所述柱塞式核酸檢測一體化卡盒的檢測步驟包括：

S1.將所需試劑、磁性物質和檢測標記物等液體或固體物質分別事先封存進試劑室組和檢測室組，活動柱塞密封，再將被檢測物放入反應室中，塞上活動柱塞；

S2.將試劑組中的反應試劑和磁性物質分別通過活動柱塞壓入反應室中與被檢測物，加熱、混勻，通過反應室內活動柱塞和溶劑室的活動柱塞的上拉與下推實現溶液的混勻；

S3.反應完后，通過反應室底部的磁性物質將被檢測物吸附在反應室，將反應試劑通過活動柱塞壓入原溶劑存放室或廢液室；

S4.重復步驟S2~3將各溶劑壓入反應室操作，對核酸進行提純、擴增、雜交的一種或多種，將被檢測物與溶劑混合均勻后，將混合溶液壓入均液室組均勻分液；

S5.將分液室中的混合液壓入與之對應的檢測室組中，通過檢測孔對混合液體進行多重定量和/或定性檢測。