[發明專利]一種藻類小分子肽提取方法

在審

• 申請號: 201910335310.1
• 申請日: 2019-04-24
• 公開（公告）號: CN110106218A
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發明（設計）人: 薛命雄;張瑋瑲;李玉芬;梁振秀;陳國珍
• 申請（專利權）人: 北海生巴達生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34
• 代理公司: 貴陽睿騰知識產權代理有限公司 52114
• 代理人: 谷慶紅

本發明涉及一種蛋白多肽技術領域，具體是一種藻類小分子肽提取方法。本發明將藻類溶于水后超聲破碎，使藻類中的蛋白等有益成分溢出，再使用漆酶、堿性蛋白酶、普魯蘭酶、絲氨酸蛋白水解酶對破碎后的混合溶液進行堿、酸交替酶解使藻類中的蛋白得到充分解離，再進行超濾后干燥，本發明的方法擁有極高的小分子肽提取率，大大提升了藻類的利用率，減少了物料浪費，又擁有較快的提取速度，是一種高效、簡便、快捷的藻類小分子肽提取方法。

技術領域

本發明涉及一種蛋白多肽技術領域，具體是一種藻類小分子肽提取方法。

背景技術

小分子肽是介于氨基酸與蛋白質之間一種生化物質，它比蛋白質分子量小，又比氨基酸分子量大，是一個蛋白質的片段。兩個以上的氨基酸之間以肽鍵相連，形成的“氨基酸鏈”或“氨基酸串”就叫做肽。其中，10-15個以上氨基酸組成的肽被稱為多肽，而由2至9個氨基酸組成的就叫做寡肽，由2至15個氨基酸組成的就叫做小分子肽或小肽。藻類含有十分豐富的各種人體必需的營養成分，能從其中提取大量的小分子肽，從其中提取的小分子肽能突破目前藻類提取物溶解性差、腥味重的局限，并且更利于人類吸收，具有較好的免疫調節、抗氧化、降血壓、抗菌等功能。

近些年來，隨著科學技術的發展，人們生活水平的不斷提高，天然活性物質與功能肽成為當前研究的熱點，如抑菌肽、抗氧化肽、降壓肽等在醫藥保健、食品加工和化妝品領域具有廣泛的應用空間，然而，一般多肽的提取技術路線為①首先將含有蛋白質的材料進行預處理如溶解，超聲波處理、反復凍融等；②將其上清液進行酶解或雙酶解等；③透析除去鹽分；④超濾法；⑤凝膠層析；⑥高效液相色譜法和電泳法等，才可獲得需要的肽段。據報道天然活性肽分子量大多為5000D以下，要想獲得這樣的小分子多肽必須進行上述步驟的研究和分析。這些工作技術要求高，儀器設備要求復雜，需要時間長，就是熟練的技術人員也需要幾天或幾周的時間，不太熟悉的技術人員要完成小分子多肽的提取就需要更長的時間。更為重要的是活細胞的多肽經過這樣漫長的提取、分離純化過程，已部分地失去了原有的活性，造成事倍功半。

因此，尋找一種高效、簡便、快捷的藻類小分子肽提取方法是當務之急。

發明內容

為了解決現有技術中存在的上述技術問題，本發明提供一種高效、簡便、快捷的藻類小分子肽提取方法，具體內容如下：

一種藻類小分子肽提取方法，包括如下步驟：

(1)稱取清洗干凈的藻類，用水溶解，使藻類均勻分散在水中，得到；

(2)將混有藻類的水溶液進行超聲破碎；

(3)將超聲破碎后的混合溶液ph調至9.2-9.8，向其中加入漆酶、堿性蛋白酶、普魯蘭酶，攪拌均勻，在35-55℃下酶解1-4h，將混合溶液中的酶滅活；

(4)將滅酶活后的混合液調ph至6.1-6.6，加入胃蛋白酶，在40-45℃下酶解20-40min，將混合溶液中的酶滅活；

(5)將滅酶活后的混合液進行超濾；

(6)將超濾后的濃縮、干燥后即得。

優選的，所述步驟(1)中，控制料液比20-60g/L。此料液比較為適中，適宜后續破碎操作進行。

優選的，所述步驟(2)的超聲破碎，是在0-10℃下，用20-40KHz的頻率進行超聲破碎。此溫度和頻率進行超聲破碎的效果較好，破碎速度較快，并且造成的損失較小。

優選的，所述步驟(3)，其中酶的具體加入量為漆酶0.24-0.36g/L、堿性蛋白酶0.65-0.85g/L、普魯蘭酶0.18-0.22g/L。此加入量較為適中，能使藻類中的蛋白得到充分酶解，并且不會造成物料浪費。

優選的，所述堿性蛋白酶，是枯草桿菌堿性蛋白酶。枯草桿菌蛋白酶是芽孢桿菌屬細菌所分泌的胞外堿性蛋白酶，屬絲氨酸蛋白水解酶類，其對藻類中的蛋白分解效果較好。