[發(fā)明專利]一種抗植物病毒ε-聚賴氨酸高產(chǎn)菌株及制備工藝

有效

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• 申請日: 2019-04-23
• 公開（公告）號: CN110055203B
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發(fā)明（設計）人: 吳元華;劉鶴;安夢楠;夏子豪;陳建光;夏博;趙秀香
• 申請（專利權(quán)）人: 沈陽農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12P13/02;C12R1/465
• 代理公司: 北京君泊知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11496
• 代理人: 李丹

本發(fā)明提供了一種抗植物病毒ε?聚賴氨酸高產(chǎn)菌株及制備工藝，所述高產(chǎn)菌株的名稱為細黃鏈霉菌(Streptomyces microflavus var.liaoningensis)X，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No.15355，保藏日期為2018年2月12日；保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所；所述一種抗植物病毒ε?聚賴氨酸的制備工藝包括以下步驟：菌種擴繁過程，發(fā)酵生成抗植物病毒ε?聚賴氨酸過程，發(fā)酵后成品制備過程。本發(fā)明的有意之處在于，本發(fā)明的一種抗植物病毒ε?聚賴氨酸高產(chǎn)菌株及制備工藝能夠大幅度提高ε?聚賴氨酸產(chǎn)量，這對于ε?聚賴氨酸的工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)具有著非常重要的意義。

技術領域

本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵工程技術領域，特別涉及一種抗植物病毒ε-聚賴氨酸的高產(chǎn)菌株及ε-聚賴氨酸的制備工藝。

背景技術

植物病毒病稱為“植物癌癥”，是繼植物真菌病后第二大植物病害，對農(nóng)業(yè)產(chǎn)生了重大損失。植物病毒一直是許多農(nóng)作物、蔬菜和觀賞植物的主要問題，嚴重影響了不同作物產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量。全世界每年因植物病毒病造成的經(jīng)濟損失高達600億美元，單因糧食作物的損失就達到了200億美元。一旦病毒入侵宿主，其繁殖就與宿主植物的代謝相結(jié)合。所以經(jīng)常出現(xiàn)的情況是抑制病毒復制的藥物也可能對宿主造成傷害，因此難以控制植物病毒病。目前，除了篩選抗病毒品種外，用于控制病毒病的最直接有效的方法就是化學藥劑。但化學農(nóng)藥雖具有提高產(chǎn)量，節(jié)省勞動力，降低病害損失風險的優(yōu)點，但也帶來了一系列嚴重問題，如植物病原體的耐藥性和環(huán)境污染的增加，農(nóng)藥殘留過多，使人畜中毒，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量下降等。

本發(fā)明提供了一種可產(chǎn)抗植物病毒ε-聚賴氨酸的細黃鏈霉菌遼寧變種(Streptomyces microflavus var.liaoningensis)。ε-聚賴氨酸是由微生物分泌的、具廣譜抗微生物活性的多肽類物質(zhì)，易被生物降解，對人體無害。作為生物防腐劑,ε-聚賴氨酸具有抗菌譜廣,穩(wěn)定性高的特點,在中性和微酸性環(huán)境中對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌、霉菌也有一定的抑菌效果，但是ε-聚賴氨酸在農(nóng)業(yè)上作用于植物病毒病的研究卻未見報道，基于此，本發(fā)明提供了可產(chǎn)抗病毒ε-聚賴氨酸的細黃鏈霉菌及其發(fā)酵方法(主要針對煙草花葉病毒)，從而能夠大幅度提高ε-聚賴氨酸產(chǎn)量，這為ε-聚賴氨酸的長遠甚至工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)提供了有利資料，墊下了堅實的基礎，且ε-聚賴氨酸很有可能成為未來高效的綠色農(nóng)藥及促進植物生長的調(diào)節(jié)劑，改變未來農(nóng)藥和農(nóng)業(yè)制劑的產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu),成為農(nóng)業(yè)發(fā)展的新方向,所以其應用前景十分廣闊，所以本發(fā)明有著非常重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術問題在于提供一種能有效控制植物病毒病害、提高農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量，同時能保障人畜安全和保護環(huán)境，高效、低毒、低殘留、無“三致”、無公害的產(chǎn)抗植物病毒ε-聚賴氨酸的細黃鏈霉菌及其制備工藝。

一種抗植物病毒ε-聚賴氨酸的高產(chǎn)菌株，其特征在于該高產(chǎn)菌株的名稱為細黃鏈霉菌遼寧變種(Streptomyces microflavus var.liaoningensis)X，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No.15355，保藏日期為2018年2月12日。

一種抗植物病毒ε-聚賴氨酸的制備工藝，其特征在于包括以下步驟：

(1)菌種擴繁過程：將所述細黃鏈霉菌遼寧變種(Streptomyces microflavusvar.liaoningensis)X接種到裝有經(jīng)20-40min滅菌后的種子培養(yǎng)基的種子罐中培養(yǎng)30～60小時制備得到種子液，控制所述種子罐的培養(yǎng)條件為溫度范圍25～35℃，pH范圍7.0～7.4，壓強范圍0.05～0.2Mpa；所述種子培養(yǎng)基按重量百分含量計的組成為玉米粉為2.0％、花生餅粉3.0％、淀粉1.0％、酵母粉0.05％、氯化鈉1.5％、硫酸銨0.02％、七水合硫酸鎂0.002％、磷酸氫二鉀0.0025％、其余為水；