[發明專利]一種腹瀉性貝毒大田軟海綿酸熒光檢測試紙及其檢測方法

有效

• 申請號: 201910330343.7
• 申請日: 2019-04-23
• 公開（公告）號: CN110018145B
• 公開（公告）日: 2022-01-25
• 發明（設計）人: 盧士英;王菡;王洋;李巖松;任洪林;胡盼;柳增善;周玉;曹旗;鄭宇
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 俞曉明

本發明屬于食品安全免疫學檢測技術領域，具體涉及一種腹瀉性貝毒大田軟海綿酸熒光檢測試紙及其檢測方法。所述試紙包括底板，所述底板上從左到右依次固接有加樣墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述硝酸纖維素膜上從左到右依次設置有檢測帶和參照帶；所述檢測帶由大田軟海綿酸?蛋白質偶聯復合物噴射在所述硝酸纖維素膜上干燥后形成；所述參照帶由抗小鼠二抗噴射在所述硝酸纖維素膜上，干燥后形成。本發明提供的試紙及檢測方法能快速、靈敏地檢測出海產樣品中的大田軟海綿酸的含量水平，適用于大量樣本毒素的安全篩查，從而為海產品食用安全提供快速檢測試劑。

技術領域

本發明屬于食品安全免疫學檢測技術領域，具體涉及一種腹瀉性貝毒大田軟海綿酸熒光檢測試紙及其檢測方法。

背景技術

大田軟海綿酸(Okadaic acid,OA)，是海洋腹瀉性貝毒(Diarrhetic ShellfishPoisoning，DSP)的主要致病因子，由有毒赤潮鰭藻屬和原甲藻屬的一些藻類產生，屬于一類脂溶性多環醚類有毒生物活性物質，可通過食物鏈在貝、螺、蛤等海洋濾食性生物體內富集，使毒性放大，毒素性質非常穩定，一般蒸、煮、炒等加工處理不能將其破壞，由誤食有毒海產品而引發中毒的事件時有發生，毒素對機體具有致癌、致畸、致突變等毒性作用。已證實OA是蛋白磷酸酶的強烈抑制劑，可與細胞膜上蛋白磷酸酶(PP2A)結合，具有強烈的促腫瘤和致癌作用。常見的急性中毒癥狀包括絞痛，寒顫，惡心，嘔吐，腹瀉，易與細菌性胃腸炎混淆。雖尚未見人類因OA中毒而致死的報道，但在所有海洋毒素中，腹瀉性貝毒在全球沿岸海域均有分布，因其分布范圍最廣，發病率最高，且中毒后無特效藥救治，成為世界范圍內對人類健康具有最嚴重威脅的赤潮藻毒素之一。

近年來，中國部分海域的腹瀉性貝類毒素調查顯示，部分可食用的貝、螺類等已經受到了腹瀉性貝毒不同程度的污染，如遼東灣、萊州灣、舟山、大連、岱山、象山、臺州、北海、湛江、海口等地的海產品均檢出不同污染水平的OA及其它DSP毒素，尤其是在夏秋季節，污染普遍，而且很多種類毒素含量超出國家食用標準。有關腹瀉性貝毒中毒事件也時有報道，2011年上半年中國東海寧德發生過食用紫貽貝引起腹瀉性貝毒中毒事件，2012年上半年遼寧遼寧省個別地區再次出現食用織紋螺中毒事件，且同年7月，溫州發生21起因食用織紋螺引起的食物中毒事件死亡1例。可見腹瀉性貝毒引起的食源性污染需引起衛生部門的注意。預防中毒的關鍵主要是保證食品安全，開展其快速檢測對人們的生命安全至關重要。

目前，國家質檢行業采用的方法主要為小鼠生物法、化學儀器法，小鼠生物法因周期長，個體差異大，不可重復等弊端，且因動物福利的逐步提升而逐漸受到動物保護組織的反對，限制了方法的實際應用；化學儀器方法主要是HPLC，HPLC-MS等，所需儀器設備昂貴，對操作人員要求高，不便于基層推廣使用。

發明內容

本發明的目的是提供一種腹瀉性貝毒大田軟海綿酸熒光檢測試紙及其檢測方法，能快速、靈敏地檢測出海產樣品中的大田軟海綿酸的含量水平，適用于大量樣本毒素的安全篩查，從而為貝類海產品食用安全提供快速檢測試劑。

本發明提供的一種腹瀉性貝毒大田軟海綿酸熒光檢測試紙，包括底板，所述底板上從左到右依次固接有加樣墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述加樣墊靠近所述硝酸纖維素膜的一端疊加且固接在所述硝酸纖維素膜一端上，所述吸水墊靠近所述硝酸纖維素膜的一端疊加且固接在所述硝酸纖維素膜的另一端上，所述硝酸纖維素膜上從左到右依次設置有檢測帶和參照帶；

所述檢測帶由大田軟海綿酸-蛋白質偶聯復合物噴射在所述硝酸纖維素膜上，干燥后形成；所述參照帶由抗小鼠二抗噴射在所述硝酸纖維素膜上，干燥后形成；

所述大田軟海綿酸-蛋白質偶聯復合物是將大田軟海綿酸與蛋白質偶聯后得到的，所述蛋白質為人免疫球蛋白hIgG或牛血清白蛋白BSA。

優選地，所述的腹瀉性貝毒大田軟海綿酸熒光檢測試紙，干燥溫度為10-37℃。