[發明專利]向心肌細胞遞送目標核酸分子的制劑、其制備方法及應用

在審

• 申請號: 201910327563.4
• 申請日: 2019-04-23
• 公開（公告）號: CN110042127A
• 公開（公告）日: 2019-07-23
• 發明（設計）人: 杜杰;李玉琳;徐福建;智瑩;許晨
• 申請（專利權）人: 北京市心肺血管疾病研究所
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87;A61K47/32;A61P9/00
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務所 11430
• 代理人: 范盈

本發明涉及一種向心肌細胞遞送目標核酸分子的制劑、其制備方法及應用。所述的遞送是指提高藥物的心肌細胞攝取，增強心臟局部藥物濃度；所述的制劑是指CHO?PGEA?核酸復合體制劑。

技術領域

本發明屬于醫藥生物領域，具體而言，涉及一種向心肌細胞遞送目標核酸分子的制劑、其制備方法及應用。

背景技術

在全球范圍內，心血管疾病仍然是導致死亡的主要原因，其患病率與年齡呈現正相關增長。隨著人口老齡化的增長，心血管疾病的患病率明顯增多。盡管，隨著醫療水平的提升，我們對心血管疾病的防治工作已取得初步成效。但從總體上看，其發病率和死亡率仍逐年遞增。其中，慢性心力衰竭常是高血壓，主動脈瓣狹窄，心肌梗死，心肌病等多種心血管疾病的終末結局。心力衰竭主要以心功能降低和心臟重塑為病理生理特點。現有的臨床治療方法雖然可緩解心衰患者的臨床癥狀，但不能阻止或逆轉心肌細胞內分子水平的改變,并且心衰患者的5年死亡率仍居高不下，令人無法接受。

相比于傳統藥物的治療，基因治療具有針對特定生物學進程的靶向性，這使它在治療心臟疾病中具有突破性意義。而基因治療在多種心臟疾病如心力衰竭和肥厚性心肌病中的應用，卻受限于藥物對心肌細胞的低轉染效率。

膽固醇(CHO)封端的乙醇胺-胺化聚(甲基丙烯酸縮水甘油酯)(CHO-PGEA)是一種新型合成的陽離子聚合物，可作為遞送核酸分子的納米載體。其原理是通過絡合核酸形成CHO-PGEA/核酸納米復合物。由于該納米粒子表面帶負電，可以被靜電吸引到帶負電的細胞膜表明，幫助它們被細胞內化。

目前，CHO-PGEA用于有效遞送質粒DNA進入腫瘤細胞中已得到證實。相比于聚陽離子基因遞送系統的金標準——聚乙烯亞胺(PEI)，CHO-PGEA具有更高效的細胞內化能力，可攜帶更多核酸分子進入腫瘤細胞中。但CHO-PGEA是否能作為納米載體，將核酸高效遞送到心肌細胞中未得到證明。值得注意的是，心肌細胞的特征性結構是橫向小管(TT)，它由內陷的心肌細胞膜形成，增加了心肌細胞表面積與體積比。^[50]此外，橫向小管中膽固醇含量也極為豐富，有利于CHO-PGEA/核酸復合物利用其粒子表面膽固醇基團，通過與心肌細胞膜的相似相溶性進入細胞內。

針對以上問題，本申請發明人通過動物模型對CHO-PGEA/核酸復合物在心肌細胞中的轉染效率進行了驗證，并利用靶向心肌肥厚的miR182抑制劑證實了CHO-PGEA/核酸復合物對心臟疾病的治療效果。

發明內容

本發明首先涉及CHO-PGEA載體在制備向心肌細胞遞送目標核酸分子的制劑中的應用，所述的目標核酸分子包括但不限于：

(1)人工合成或天然存在的用于調節心臟功能的單鏈或雙鏈DNA分子；

(2)人工合成或天然存在的用于調節心臟功能的編碼或非編碼RNA分子；

(3)人工合成或天然存在的用于治療心血管疾病的單鏈或雙鏈DNA分子；

(4)人工合成或天然存在的用于治療心血管疾病的編碼或非編碼RNA分子；

(5)人工合成的用于調節心臟功能的RNA模擬物以及反義寡核苷酸片段。

所述的遞送是指提高心肌細胞對目標核酸分子的攝取，提高心臟局部尤其是心肌細胞內的目標核酸分子的濃度。

優選的，所述的CHO-PGEA載體中的載體分子的氮/磷比為10。

本發明還涉及一種治療心臟疾病的藥物組合物，所述的治療是指在動物或人體內修復心臟功能、減輕心臟重塑癥狀體征或改善心臟疾病引發的癥狀體征，所述的藥物組合物包含治療有效量的所述制劑和常規的藥用輔料。

本發明還涉及所述的制劑在制備治療心臟疾病的藥物中的應用，所述的治療是指在動物或人體內修復心臟功能、減輕心臟重塑癥狀體征或改善心臟疾病引發的癥狀體征。