[發明專利]一種高效疏水相互作用色譜介質、制備方法及其在提取丹酚酸B中的應用

在審

• 申請號: 201910322499.0
• 申請日: 2019-04-22
• 公開（公告）號: CN109939659A
• 公開（公告）日: 2019-06-28
• 發明（設計）人: 王驪麗;張念喆;高棟
• 申請（專利權）人: 西北大學
• 主分類號: B01J20/281
• 分類號: B01J20/281;B01J20/30;C07D307/86
• 代理公司: 西安億諾專利代理有限公司 61220
• 代理人: 王轉

本發明公開一種高效疏水相互作用色譜介質，其結構式如下：，其中，R為或者。同時，還公開了所述色譜介質的制備方法及其在提取丹酚酸B中的應用。本發明所提供的高效疏水相互作用色譜介質，不但能降低丹酚酸B的分離成本，減少了有機溶劑的使用，對環境無污染，而且還可以從丹參中獲得高純度的丹酚酸B，并且丹酚酸B的質量回收率高。

技術領域

本發明屬于高效液相色譜技術領域，具體涉及一種高效疏水相互作用色譜介質、制備方法及其在提取丹酚酸B中的應用。

背景技術

以酚酸類為主的丹酚酸B（Salvianolia acid B）是丹參水溶性成分中重要的活性物質。研究發現，丹酚酸B具有很強的生物活性，對脂質過氧化引起的細胞膜損傷有明顯的保護作用，有抗血小板聚集和抗血栓的作用，同時對腎功能不全和肝損傷均有一定保護作用等[Chinese Journal of Natural Medicines（中國天然藥物），13 (2015) 163-182；Chinese Journal of Integrative Medicine（中國結合醫學雜志），18 (2012) 316-320.]。其中，色譜技術對分離丹酚酸B具有很大的優勢，采用流動相為鹽-水的洗脫體系，實現了對環境無污染的要求，且操作簡單。

高效疏水相互作用色譜法（High Performance Hydrophobic InteractionChromatography，簡稱HPHIC）是依據其固定相具有適當疏水性基團的疏水作用，在高鹽濃度下保留，低鹽濃度洗脫的分離機制，易于保持被分離成分的活性，在固定相組成上采用了一些疏水性基團作為配基，如芳基胺、酸酐、PEG（聚乙二醇）等分子，這些配基與活化的硅膠基質表面鍵合成具有疏水性的固定相。但是，現有的高效疏水相互作用色譜介質疏水強弱不同，丹酚酸B的質量回收率比較低。為了進一步提高目標物的含量，我們對這類介質進行改進。

發明內容

針對現有技術的缺陷，本發明提供一種高效疏水相互作用色譜介質、制備方法及其在提取丹酚酸B中的應用，提取的丹酚酸B純度高，操作簡單。

一種高效疏水相互作用色譜介質，結構式如下：

，

其中，R為

或者。

所述高效疏水相互作用色譜介質的制備方法，包括以下步驟：

（1）硅膠活化；

（2）制備環氧化硅膠：按照1g：50mL將步驟（1）得到的活化硅膠加入無水甲苯中，超聲處理3-5min，然后在攪拌條件下向其中緩慢加入硅烷偶聯劑γ-縮水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷，所述活化硅膠和硅烷偶聯劑的質量體積比為1g:1mL~1g:2 mL，升溫至90-120 ℃，回流并攪拌8-10h，然后用甲醇、水、甲醇洗滌抽濾，重復洗滌抽濾5次，在60℃下真空干燥12h，即得到環氧硅膠；

（3）環氧開環制備高效疏水相互作用色譜介質：將苯乙胺或者3-苯基丙胺與步驟（2）得到的環氧化硅膠加入1，4-二氧六環中，超聲處理3-5min，80℃回流并攪拌7~8h，然后用甲醇、水、甲醇洗滌抽濾，重復5次，真空干燥，即可；其中，苯乙胺或者3-苯基丙胺、環氧化硅膠、1，4-二氧六環的比例為0.3mL：1g：50mL。

優選地，步驟（1）所述硅膠活化的步驟具體如下：將孔徑為90-100?，粒徑為5～10μm的硅膠微球加入體積濃度為20%的鹽酸溶液中，在120℃下回流4-6h，冷卻后，用蒸餾水洗滌抽濾至中性，在100~150℃真空干燥箱中干燥12~24h，即得到活化硅膠。

所述高效疏水相互作用色譜介質的應用，具體為：將所述高效疏水相互作用色譜介質應用于高效液相色譜來從丹參中提取丹酚酸B。

所述從丹參中提取丹酚酸B的方法具體如下：