[發(fā)明專利]一種高效疏水相互作用色譜介質(zhì)、制備方法及其在提取丹酚酸B中的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910322499.0
• 申請(qǐng)日: 2019-04-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109939659A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-06-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王驪麗;張念喆;高棟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西北大學(xué)
• 主分類號(hào): B01J20/281
• 分類號(hào): B01J20/281;B01J20/30;C07D307/86
• 代理公司: 西安億諾專利代理有限公司 61220
• 代理人: 王轉(zhuǎn)

1.一種高效疏水相互作用色譜介質(zhì)，其特征在于：所述高效疏水相互作用色譜介質(zhì)的結(jié)構(gòu)式如下：

，

其中，R為

或者。

2.權(quán)利要求1所述高效疏水相互作用色譜介質(zhì)的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）硅膠活化；

（2）制備環(huán)氧化硅膠：按照1g：50mL將步驟（1）得到的活化硅膠加入無(wú)水甲苯中，超聲處理3-5min，然后在攪拌條件下向其中緩慢加入硅烷偶聯(lián)劑γ-縮水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷，所述活化硅膠和硅烷偶聯(lián)劑的質(zhì)量體積比為1g:1mL~1g:2 mL，升溫至90-120 ℃，回流并攪拌8-10h，然后用甲醇、水、甲醇洗滌抽濾，重復(fù)洗滌抽濾5次，在60℃下真空干燥12h，即得到環(huán)氧硅膠；

（3）環(huán)氧開(kāi)環(huán)制備高效疏水相互作用色譜介質(zhì)：將苯乙胺或者3-苯基丙胺與步驟（2）得到的環(huán)氧化硅膠加入1，4-二氧六環(huán)中，超聲處理3-5min，80℃回流并攪拌7~8h，然后用甲醇、水、甲醇洗滌抽濾，重復(fù)5次，真空干燥，即可；其中，苯乙胺或者3-苯基丙胺、環(huán)氧化硅膠、1，4-二氧六環(huán)的比例為0.3mL：1g：50mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：步驟（1）所述硅膠活化的步驟具體如下：將孔徑為90-100?，粒徑為5～10 μm的硅膠微球加入體積濃度為20%的鹽酸溶液中，在120℃下回流4-6h，冷卻后，用蒸餾水洗滌抽濾至中性，在100~150℃真空干燥箱中干燥12~24h，即得到活化硅膠。

4.權(quán)利要求1所述高效疏水相互作用色譜介質(zhì)的應(yīng)用，其特征在于：所述應(yīng)用為將所述高效疏水相互作用色譜介質(zhì)應(yīng)用于高效液相色譜來(lái)從丹參中提取丹酚酸B。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述應(yīng)用，其特征在于：所述從丹參中提取丹酚酸B的方法具體如下：

（1）丹酚酸B粗提樣品的制備：將丹參切片，加入純水中，在45-55℃下浸泡12-18h，然后攪拌2h，靜置，用紗布過(guò)濾后，再將得到的濾液離心，所得上清液即為丹酚酸B粗提樣品；

（2）色譜柱裝填：采用濕法勻漿裝柱，稱取1.5-2.0 g所述高效疏水相互作用色譜介質(zhì)，以甲醇為勻漿液超聲5 min后，在30-40 MPa下，裝填色譜柱，30 min后卸下，連接到色譜儀上，在流速1-2 mL/min下用水沖洗三次，每次沖洗1 h；

（3）高純度丹酚酸B的制備：丹酚酸B粗提樣品直接進(jìn)樣至步驟（2）所得的色譜柱中，收集色譜餾分，色譜條件如下：采用流動(dòng)相A為2-3 mol/L (NH₄)₂SO₄、10 mmol/L KH₂PO₄、pH7.0；流動(dòng)相B為10 mmol/L KH₂PO₄或H₂O，pH7.0；流速為1.5-2.0 mL/min；采用0-100% 流動(dòng)相B線性梯度洗脫30 min，100% 流動(dòng)相B延長(zhǎng)10 min；檢測(cè)波長(zhǎng)286 nm；進(jìn)樣量為100-1000μL；

（4）丹酚酸B成品制備與鑒定：將步驟（3）收集的色譜餾分冷凍干燥，得到丹酚酸B成品。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述應(yīng)用，其特征在于：步驟（1）中所述丹參與純水的比例為1g：120mL。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述應(yīng)用，其特征在于：步驟（1）中所述離心的具體條件為：離心轉(zhuǎn)速5000-10000 rpm、離心時(shí)間15min。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述應(yīng)用，其特征在于：步驟（4）中所述冷凍干燥的條件為在-80℃中冷凍10-12h。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述應(yīng)用，其特征在于：步驟（2）中，所述色譜柱為100×4.6 mm i.d.的不銹鋼色譜柱或者10 ×20 mm i.d的餅型色譜柱。