[發明專利]一種糞便脫落細胞及其核酸保存試劑及其制備和應用

在審

• 申請號: 201910321000.4
• 申請日: 2019-04-21
• 公開（公告）號: CN110029102A
• 公開（公告）日: 2019-07-19
• 發明（設計）人: 鞠巍;沈歡;徐根明;潘藝;趙謙
• 申請（專利權）人: 湖南大地同年生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 長沙睿翔專利代理事務所(普通合伙) 43237
• 代理人: 周松華;孫建霞

1.一種糞便脫落細胞及其核酸保存試劑，其特征在于包括緩沖試劑、金屬離子螯合劑、抑菌劑、離子型去垢劑和表面活性劑；其中所述的緩沖試劑是pH 7～10的50mM～1M Tris-HCl或磷酸鹽緩沖液；所述的金屬離子螯合劑是1mM～100mM乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸的水溶性鹽中的至少一種；所述的抑菌劑是二醇類、苯甲醇、苯乙醇、ProClin^TM 300和NaCl中的至少一種；所述的離子型去垢劑選自濃度0.1％～10％的十二烷基硫酸鈉、十二烷基璜酸鈉、十二烷基硫酸鋰、癸基硫酸鈉、辛基硫酸鈉、月桂醇聚氧乙烯醚硫酸酯鈉、尿素等中的至少一種；所述的表面活性劑為非離子型去污劑，包括濃度0.5％～10％Brij-35、Tween-20、Tween-80、NP40和Triton-100中的至少一種。

2.根據權利要求1所述的一種糞便脫落細胞及其核酸保存試劑，其特征在于所述的緩沖試劑pH值為8～9，濃度范圍為300mM～500mM。

3.根據權利要求1所述的一種糞便脫落細胞及其核酸保存試劑，其特征在于所述的金屬離子螯合劑濃度為30mM～60mM。

4.根據權利要求1所述的一種糞便脫落細胞及其核酸保存試劑，其特征在于所述的抑菌劑選擇ProClin^TM 300和NaCl中的至少一種，抑菌劑ProClin^TM 300的濃度為0.03％～0.1％。，NaCl的濃度為50mM～1M。

5.根據權利要求1所述的一種糞便脫落細胞及其核酸保存試劑，其特征在于所述的離子型去垢劑選擇十二烷基硫酸鈉和十二烷基璜酸鈉的至少一種，濃度為1％～5％。

6.根據權利要求1所述的一種糞便脫落細胞及其核酸保存試劑，其特征在于所述的非離子型表面活性劑選擇NP40和Triton-100中的至少一種，濃度為1％～3％。

7.如權利要求1所述的一種糞便脫落細胞及其核酸保存試劑的制備方法，其特征在于按照以下步驟進行：

(1)根據要配制的保存液體積，在無菌去離子水中加入緩沖試劑、金屬離子螯合劑、抑菌劑、離子型去垢劑和非離子型表面活性劑；

(2)用鹽酸或NaOH將溶液pH值調至8～9；

(3)用無菌去離子水將溶液保存液調至所要求的體積，混勻，即得所需保存液，保存液常溫保存。

8.一種糞便脫落細胞及其核酸保存試劑在保存糞便脫落細胞及其核酸上的應用。