[發明專利]利用選擇性過濾柱對法醫檢樣中DNA進行純化濃縮的方法在審
| 申請號: | 201910319898.1 | 申請日: | 2019-04-19 |
| 公開(公告)號: | CN110129313A | 公開(公告)日: | 2019-08-16 |
| 發明(設計)人: | 張丹;熊槐;梁龍杰 | 申請(專利權)人: | 山東森芃生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 北京和信華成知識產權代理事務所(普通合伙) 11390 | 代理人: | 胡劍輝 |
| 地址: | 264300 *** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 選擇性過濾 檢樣 離心管 濃縮 超濾膜 透過性 裂解 法醫 生物大分子物質 大分子物質 小分子物質 離心機 消化 高速離心 人源細胞 裂解液 細胞液 內管 游離 震蕩 殘留 | ||
1.利用選擇性過濾柱對法醫檢樣中DNA進行純化濃縮的方法,其特征在于,具體如下:
第一步,將消化裂解后的細胞液加入選擇性過濾柱的內管中,同時將選擇性過濾柱在3000-14000r/min的離心機中離心1-10min,將小分子物質過濾除去;
第二步,向選擇性過濾柱內加入5-100微升水,震蕩30s后,將選擇性過濾柱內的水溶液轉移至干凈的離心管內,此時離心管的溶液即為純化濃縮后的溶液;
其中選擇性過濾柱包括外管和套設在外管內部的內管,內管的管底開有出液口,出液口處一體連接固定有出液管,同時內管的側壁內表面位于出液口的上方安裝有支撐板,支撐板的表面開有若干濾液孔,同時支撐板的表面從下到上依次設有超濾膜和密封壓圈,密封壓圈壓緊在超濾膜的表面。
2.根據權利要求1所述的利用選擇性過濾柱對法醫檢樣中DNA進行純化濃縮的方法,其特征在于,細胞液的具體消化裂解過程如下:①對法醫檢樣進行取材,加入細胞裂解消化液,在50-80℃下裂解消化15min-12h;②將裂解消化后的細胞液放入離心管中,在3000-14000r/min的離心機中離心1-10min,然后取離心管中上清溶液至選擇性過濾柱內。
3.根據權利要求1所述的利用選擇性過濾柱對法醫檢樣中DNA進行純化濃縮的方法,其特征在于,所述超濾膜為孔徑范圍為1nm-100nm的微孔過濾膜。
4.根據權利要求1所述的利用選擇性過濾柱對法醫檢樣中DNA進行純化濃縮的方法,其特征在于,超濾膜的材質為纖維素、纖維素的衍生物、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺交鏈的聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚砜酰胺、磺化聚砜中的一種,或其它能制成孔徑范圍為1nm-20nm超濾膜的材質。
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