[發明專利]用于免疫增強的錳組合物

在審

• 申請號: 201910319344.1
• 申請日: 2019-04-19
• 公開（公告）號: CN111821316A
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發明（設計）人: 蔣爭凡;王晨光;張睿;呂夢澤
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: A61K33/32
• 分類號: A61K33/32;A61K39/39;A61K45/06;A61P37/04;A61P31/04;A61P31/10;A61P31/12;A61P33/00;A61P35/00;A61P37/02;A61P31/14;A61P31/20;A61P31/22;A61P31/1
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 彭鯤鵬

本發明提供了包含新生沉淀錳和/或膠體錳的免疫增強組合物和疫苗組合物，其制備方法，以及它們用于增強免疫和或疫苗接種的用途。

技術領域

本發明提供了用于增強免疫的二價錳膠體或二價錳新生沉淀，以及其 用于增強免疫的用途，這種免疫增強用途例如可用于作為免疫佐劑、抗病 毒或抗腫瘤。

背景技術

機體通過天然免疫系統和適應性免疫系統保護機體免于外來病原體 的侵染。天然免疫對于適應性免疫有著促進作用。當機體被病源體感染時， 首先啟動了天然免疫反應，通過模式識別受體識別病原體的病源相關分子 模式，激活多種信號通路，如TLR通路(1)、RLR通路(2)、cGAS-STING 通路(3)、炎癥小體活化(4)等，這些通路的激活導致下游眾多細胞因子的 產生，包括I型干擾素、IL-1β、IL-18等。

I型干擾素通過自分泌和旁分泌途徑可激活JAK-STAT通路，誘導 大量抗病毒基因的表達，達到抵抗病毒感染的效果(5,6)。同時I型干擾素 可促進抗原遞呈細胞的成熟(7)，抗原遞呈細胞將病源微生物或腫瘤抗原 遞呈給T細胞，激活抗原特異性CD4⁺T細胞和CD8⁺T細胞；同時也可 促進B細胞活化產生抗原特異性抗體；及促進產生記憶性B細胞及免疫 記憶。

促炎因子IL-1β能直接作用于CD4⁺T細胞，促進T細胞的增殖(8)； IL-18可以有效增強Th1免疫反應，也可以促進T細胞和NK細胞的增殖 和細胞毒作用(9)。

目前已經被FDA批準在人身上使用的佐劑有四種：鋁佐劑、MF59、 AS03、AS04。鋁佐劑從1920年以來一直被廣泛使用，被用于甲肝(HAV) 疫苗、乙肝(HBV)疫苗、百白破(DTP)疫苗、人乳頭瘤病毒(HPV) 疫苗、流感嗜血桿菌(HiB)疫苗等。鋁佐劑只能激活Th2反應(以抗體 產生為主的體液免疫)，不能激活Th1反應(以CD8⁺T細胞為主的細胞 免疫)(10)。AS04是包含MPL和鋁鹽的佐劑，被用于HPV疫苗和HBV 疫苗。該佐劑能激活NF-kB，產生促炎因子，具備了鋁佐劑原來不具備 的激活Th1反應的能力。MF59是一種以角鯊烯為油相制成的油包水類型

目前未批準臨床應用，但在實驗室中可使用的佐劑有很多，其中很多 效果很好，但是由于其副作用限制了在臨床上的應用，如弗氏佐劑的礦物 油成分代謝能力差，在注射部位會形成結節。還有細胞因子類型的佐劑， 如白細胞介素-2、干擾素，它們的缺點是成本昂貴。

目前有報道證明激活cGAS-STING通路的配體能夠作為佐劑，如 DMXAA(12)、c-di-GMP(13)、cGAMP(14)、chitosan(15)。

CN107412260A公開了二價錳是一種cGAS-STING通路激活劑，具 有增強免疫的作用，例如可用作免疫佐劑。然而，在進一步研究中，發明 人意外發現二價錳本身還存在一些缺陷，還需要改進的方案以消除至少一 種所述缺陷。

發明內容

發明人在進一步研究二價錳免疫增強作用中發現，盡管二價錳溶液可 以在機體中產生免疫增強作用，然而這種免疫增強作用還不夠高。更重要 的是，研究過程中還發現，當希望提高二價錳溶液的濃度，以便提高免疫 增強作用時，很容易產生錳沉淀，導致無法獲得均勻穩定的高濃度二價錳 溶液，使得實驗的可重復性無法得到有效保證。這種錳沉淀隨著放置時間 增加而逐漸團聚化增長。

在無法實現期望的高濃度二價錳溶液的情況下，發明人不得已使用二 價錳沉淀繼續其免疫增強作用的研究。由于實驗操作的疏忽，發明人無意 中使用了放置不同時間的二價錳沉淀。發明人意外發現，不同放置時間的 二價錳沉淀具有不同的免疫增強作用，而且新生沉淀的免疫增強作用顯著 優于放置時間更長的錳沉淀。發明人進一步比較了二價錳溶液和放置不同 時間的二價錳沉淀，又意外地發現，新生錳鹽沉淀的免疫增強作用竟然還 顯著優于二價錳溶液。