[發明專利]一種具有抗菌及免疫調節雙功能的二聚體多肽及其應用

有效

• 申請號: 201910318500.2
• 申請日: 2019-04-19
• 公開（公告）號: CN110066317B
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 沈秉正;曹志賤;喻研;宋金春;涂毅;馮莉芳;祝成亮;高翔;黃亞冰;高越
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/04;C07K1/06;C07K1/20;C07K1/14;A61K38/10;A61P31/04;A61P37/02
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 彭勁松

本發明公開了一種具有抗菌以及免疫調節雙功能的二聚體多肽及其應用，屬于生物醫藥領域。該多肽通過常規的多肽固相合成技術分成兩段制備，再通過半胱氨酸側鏈的巰基配對形成二硫鍵，最后通過半制備反向高效液相色譜純化得到。藥理學實驗研究結果表明該多肽對革蘭氏陽性菌有良好的抑制作用；亦能抑制由脂多糖誘導的鼠源性巨噬細胞RAW264.7中促炎細胞因子TNF?α、IL?1β、IL?6及IL?17的表達，促進抗炎細胞因子IL?10的表達。同時，該雙功能多肽呈現出低溶血活性，且人工制備便捷、藥理活性明確，具有進一步開發價值以及有產業化的潛力。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一種具有抗菌及免疫調節雙重藥理功能的二聚體多肽及其制備方法與應用。

背景技術

自1928年亞歷山大·弗萊明(Alexander Fleming)從青霉菌中發現了青霉素以來，包括天然及人工合成的抗菌劑的廣泛使用，一方面使得細菌感染性疾病得到了很好的治療，但另一方面又給菌株帶來了巨大的選擇壓力(抵抗抗生素的能力)。

2016年8月5日，中國發布《遏制細菌耐藥國家行動計劃(2016-2020年)》(國衛醫發[2016]43號)，成為少數具備與抗生素和耐藥性作斗爭的全面計劃的國家之一。復旦大學附屬華山醫院抗生素研究所牽頭組織的中國細菌耐藥協作網(China AntimicrobialSurveillance Network,CHINET)自2005年起對22個地區的30余所綜合醫院/兒童醫院收集相關數據整理分析。2005-2017年間所檢出菌株的臨床樣本來源——呼吸道是最重要的樣本來源(占比大于40％)，其次為尿液(占比為20％左右)，再次為血液樣本和傷口膿液樣本。將歷年檢出的菌株數據按照革蘭染色進行分類統計，結果呈現出“陰盛陽衰”的趨勢。所檢出的菌株中革蘭氏陰性菌占比均大于65％，且在2009年后穩定在70％以上，具有絕對的優勢。2017年所檢出的134952株革蘭氏陰性菌株中，檢出率排在前六位為病原細菌菌株分別為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌、陰溝腸桿菌及嗜麥芽窄食單胞菌。對臨床樣本中所分離到的36 735株大腸埃希菌的藥敏實驗分析可知，慶大霉素、氨芐西林/舒巴坦、復方磺胺甲惡唑、環丙沙星、頭孢噻肟、頭孢呋辛、派拉西林和氨芐西林的的耐藥率均超過40％。肺炎克雷伯菌屬的臨床分離率呈現逐年上升趨勢，同時其耐藥情況也不容樂觀，其對臨床上用于治療院內獲得性肺炎、敗血癥、腹膜炎以及中性粒細胞減少發熱等重癥感染患者所使用的碳青霉烯類抗生素(如亞胺培南、美羅培南和厄他培南)耐藥率也已超過14％。

對于革蘭氏陽性細菌，2017年全國34所醫院耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin Resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的檢出率在10％～65％，平均檢出率為35.3％。而耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(Methicillin Resistant Coagulase-Negative Staphylococci,MRCNS)的檢出率在48.2％～99.4％，平均檢出率高達80.3％。近十余年MRSA和MRCNS的檢出率變化趨勢為：MRSA的檢出率呈現出逐年下降趨勢，而MRCNS的檢出率雖有小幅波動但總體趨穩(71.6％～82.0％)。2017年CHINET數據所統計結果表明：少數對萬古霉素和替考拉寧敏感的MRCNS菌株卻對利奈唑胺耐藥，而MRCNS對利福平相對較敏感(耐藥率僅為13.1％)，對其它抗菌藥物的耐藥率均接近或大于30％。

目前一些從臨床樣本中分離出的菌株具有非常強的適應性，對一種或多種抗菌劑均具有抗性。這些耐藥菌可導致嚴重的危及生命的疾病或/和并發癥，更為不幸的是，由于缺乏強有力的藥物來遏制多藥耐藥病原細菌的威脅，菌株耐藥的威脅在不斷增加。這種現狀導致醫院和社區中現行治療方案效果不佳，且在治療細菌感染性疾病時需要使用更高劑量的抗菌劑和/或更長的住院時間。在藥物使用上的支出與其產生的效益之間的差距越來越大，因此需要發現新型天然抗菌劑，或使用創新的設計策略人工制備新化學實體(NewChemical Entity)來對抗細菌耐藥。