[發(fā)明專(zhuān)利]構(gòu)建阿爾茨海默病血液中tau蛋白含量檢測(cè)系統(tǒng)的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910304378.3
• 申請(qǐng)日: 2019-04-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109975378A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-07-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭振中;稅冰清;陶丹
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 武漢科技大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N27/327
• 分類(lèi)號(hào): G01N27/327;G01N27/48
• 代理公司: 北京金智普華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11401
• 代理人: 楊采良

本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，公開(kāi)了一種構(gòu)建阿爾茨海默病血液中tau蛋白含量檢測(cè)系統(tǒng)的方法，應(yīng)用電極表面修飾技術(shù)，將抗體修飾到電極表面，適配體通過(guò)共價(jià)結(jié)合組裝在金納米顆粒上，利用抗體與tau蛋白的特異性結(jié)合作用將tau蛋白結(jié)合到電極表面，并在適配體的作用下增強(qiáng)其特異性吸附，構(gòu)建出適配體?抗體夾心模式的電化學(xué)生物傳感器，用于檢測(cè)阿爾茨海默病血液中tau蛋白含量。本發(fā)明電化學(xué)生物傳感器應(yīng)用較為廣泛，電化學(xué)生物傳感器相較于傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法而言，具有制備簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好、分析速度快、使用方便、成本低等優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種構(gòu)建阿爾茨海默病血液中tau蛋白含量檢測(cè)系統(tǒng)的方法。

背景技術(shù)

目前，最接近的現(xiàn)有技術(shù)：

阿爾茨海默病(Alzheimer's Disease，簡(jiǎn)稱(chēng)AD)是最常見(jiàn)的慢性神經(jīng)退行性疾病，AD研究領(lǐng)域的一個(gè)關(guān)鍵性進(jìn)展是證明了兩個(gè)經(jīng)典的神經(jīng)病理性改變老年斑塊和神經(jīng)原纖維纏結(jié)是AD病理進(jìn)程中的最后結(jié)果。其中，老年斑的主要組成物質(zhì)是β-淀粉樣蛋白(Amyloidβ-protein，簡(jiǎn)稱(chēng)Aβ)，神經(jīng)元纖維纏結(jié)主要成分是tau蛋白。

目前AD確診仍需尸檢發(fā)現(xiàn)老年斑，神經(jīng)元纖維纏結(jié)及特定部位的神經(jīng)元選擇性減少，而這對(duì)于活著的患者是無(wú)法做到的。tau蛋白沉積是AD主要的病理學(xué)基礎(chǔ)，其異常磷酸化在AD患者神經(jīng)細(xì)胞變性和學(xué)習(xí)記憶障礙發(fā)生發(fā)展中起重要作用，AD患者腦內(nèi)tau蛋白的含量越高其臨床癡呆程度越嚴(yán)重。目前用于檢測(cè)tau蛋白的主要檢測(cè)技術(shù)是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，簡(jiǎn)稱(chēng)ELISA)方法，此方法特異性較高，但敏感度較差，仍需進(jìn)一步深入研究，這也促使了高靈敏度、高特異性的生物傳感器在檢測(cè)tau蛋白中的應(yīng)用。其中，電化學(xué)生物傳感器應(yīng)用較為廣泛，電化學(xué)生物傳感器相較于傳統(tǒng)的ELISA方法而言，具有制備簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好、分析速度快、使用方便、成本低等優(yōu)點(diǎn)，目前尚未有將適配體-抗體夾心模式結(jié)合電化學(xué)生物傳感器用于檢測(cè)阿爾茨海默病患者血液中低水平(pmol/L級(jí)別)的tau蛋白含量。

綜上所述，現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題是：

(1)現(xiàn)有阿爾茨海默病血液中tau蛋白含量檢測(cè)技術(shù)中，特異性較高，敏感度較差，而且現(xiàn)有技術(shù)有電化學(xué)生物傳感器檢測(cè)tau蛋白的研究了，但是沒(méi)有結(jié)合適配體-抗體夾心模式的研究電化學(xué)生物傳感器應(yīng)用于阿爾茨海默病血液tau蛋白含量檢測(cè)中，造成現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)分析速度慢、使用不方便、成本高。

解決上述技術(shù)問(wèn)題的難度：

本發(fā)明研發(fā)優(yōu)勢(shì)更為顯著的適配體-抗體夾心電化學(xué)生物傳感器用于檢測(cè)較低濃度的tau蛋白。傳統(tǒng)抗原抗體模式下，兩者結(jié)合后，在空間上干擾了抗體與相應(yīng)決定簇的結(jié)合，導(dǎo)致抗體非特異性識(shí)別，而適配體在抗原抗體的基礎(chǔ)上再一次特異性識(shí)別，增強(qiáng)了抗原的特異性吸附能力。因此，將生物信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)的適配體-抗體夾心電化學(xué)生物傳感器，克服了傳統(tǒng)模式的局限性，結(jié)合了適配體與抗體兩者的強(qiáng)特異性，從而獲得更加靈敏而真實(shí)的電信號(hào)用于檢測(cè)血液中的tau蛋白，解決上述技術(shù)問(wèn)題的難度較小。

解決上述技術(shù)問(wèn)題的意義：

本發(fā)明構(gòu)建了一種阿爾茨海默病血液中tau蛋白含量檢測(cè)系統(tǒng)的方法，通過(guò)定量檢測(cè)tau蛋白反映AD患者的癡呆程度，為診斷AD和評(píng)估患者病情提供指導(dǎo)；為疑似AD患者血液檢測(cè)研究提供基礎(chǔ)，從而提高AD篩查率；具有一定的醫(yī)學(xué)臨床實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種構(gòu)建阿爾茨海默病血液中tau蛋白含量檢測(cè)系統(tǒng)的方法。