[發(fā)明專利]一種功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910304066.2
• 申請(qǐng)日: 2019-04-16
• 公開（公告）號(hào): CN110025828B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王為華;王建南;裔洪根
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州科技城醫(yī)院;蘇州大學(xué)
• 主分類號(hào): A61L27/22
• 分類號(hào): A61L27/22;A61L27/50;A61L27/54;A61L27/56;C08J5/18;C08J9/40
• 代理公司: 蘇州翔遠(yuǎn)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32251
• 代理人: 陸金星

本發(fā)明公開了一種功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜及其制備方法，先制備脫膠后的家蠶絲素纖維，然后制備家蠶絲素溶解液，接著制備純化后的家蠶絲素蛋白水溶液，再制備絲素蛋白多孔材料或絲素蛋白膜，最后制備功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜。所制備的功能絲素蛋白多孔材料和功能絲素蛋白膜屬于非溶血性材料，溶血率0.4％，功能絲素蛋白多孔材料和功能絲素蛋白膜穩(wěn)定載有一種活性肽，這種活性肽能夠調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞與平滑肌細(xì)胞的競爭性生長及活化血管的舒張功能。本發(fā)明獲得的功能絲素蛋白多孔材料和功能絲素蛋白膜用于組裝人工血管、造瘺等血管組織工程具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及載藥的絲素蛋白材料的制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜及其制備方法。

背景技術(shù)

家蠶蠶絲是由家蠶合成與分泌的天然動(dòng)物蛋白，來源廣泛，其絲素蛋白具有良好的生物相容性，由20種人體可吸收的氨基酸組成，最終降解產(chǎn)物為氨基酸或小肽，易被細(xì)胞吸收或吞噬，不會(huì)引起明顯的免疫反應(yīng)。大量的研究表明絲素蛋白材料能夠支持多種細(xì)胞的生長，在組織工程支架中越來越多地被研究與應(yīng)用。

本發(fā)明旨在開發(fā)一種載有降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)的絲素蛋白功能材料，應(yīng)用于血管組織再生修復(fù)。CGRP是一個(gè)由37個(gè)氨基酸組成的廣泛分布于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的活性肽，是中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)傳遞信息的重要遞質(zhì)。神經(jīng)系統(tǒng)是遍布全身的調(diào)節(jié)機(jī)體各項(xiàng)生理功能與行為活動(dòng)的系統(tǒng)。CGRP也是體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的最有效的舒血管活性肽，在調(diào)節(jié)血壓、保護(hù)心臟和防止冠狀動(dòng)脈粥樣硬化有著重要作用。幾乎所有的血管中都分布著含有CGRP的神經(jīng)纖維。CGRP活性肽具有刺激血管舒張，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖的作用，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長并遷移到受損血管壁。CGRP活性肽作為保護(hù)性成分，具有抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移，參與血管損傷修復(fù)等功能。因此，將CGRP活性肽載入血管組織工程支架中用于調(diào)控缺損血管再生或功能修復(fù)具有重大的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一種功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜及其制備方法，是針對(duì)血管組織工程易形成血栓和血管組織再生早期舒張活性較低而開發(fā)，以促進(jìn)病變和缺損血管的組織再生與功能恢復(fù)。

本發(fā)明的一種技術(shù)方案是：

提供一種功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜，其加載了CGRP。

本發(fā)明的另一種技術(shù)方案是：

提供一種功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜的制備方法，該方法包括如下步驟：

(1)制備脫膠后的家蠶絲素纖維：將家蠶蠶絲或繭殼放入碳酸鈉水溶液中，加溫處理，清洗，拉松，干燥，得到脫膠后的家蠶絲素纖維；

(2)制備家蠶絲素溶解液：將所述脫膠后的家蠶絲素纖維完全溶解于溴化鋰水溶液中，獲得絲素溶解液；

(3)制備純化后的家蠶絲素蛋白水溶液：將所述絲素溶解液灌注于透析袋內(nèi)，然后置于盛有去離子水的容器內(nèi)，每隔2小時(shí)用新的去離子水或者純水更換容器內(nèi)的液體，持續(xù)透析3天后濃縮，得到純化后的家蠶絲素蛋白水溶液；

(4)制備絲素蛋白多孔材料或絲素蛋白膜：將所述純化后的家蠶絲素蛋白水溶液倒入一平整的聚苯乙烯平皿中，凍干或烘干，取出置于盛有80％乙醇的容器中浸漬2小時(shí)，然后取出放入盛有去離子水的容器內(nèi)浸泡1～2天，每隔2小時(shí)更換一次容器內(nèi)的去離子水，取出后再次凍干或風(fēng)干，得到絲素蛋白多孔材料或絲素蛋白膜；

(5)制備功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜：將所述絲素蛋白多孔材料浸于混合溶液中，或者在所述絲素蛋白膜上加入混合溶液，然后置于4℃下反應(yīng)8～15小時(shí)后取出，用去離子水漂洗并凍干或在低于25℃的條件下風(fēng)干，得到功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜。