[發明專利]一種功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜及其制備方法

有效

• 申請號: 201910304066.2
• 申請日: 2019-04-16
• 公開（公告）號: CN110025828B
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 王為華;王建南;裔洪根
• 申請（專利權）人: 蘇州科技城醫院;蘇州大學
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L27/50;A61L27/54;A61L27/56;C08J5/18;C08J9/40
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 陸金星

1.一種功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

(1)制備脫膠后的家蠶絲素纖維：將家蠶蠶絲或繭殼放入碳酸鈉水溶液中，加溫處理，清洗，拉松，干燥，得到脫膠后的家蠶絲素纖維；

(2)制備家蠶絲素溶解液：將所述脫膠后的家蠶絲素纖維完全溶解于溴化鋰水溶液中，獲得絲素溶解液；

(3)制備純化后的家蠶絲素蛋白水溶液：將所述絲素溶解液灌注于透析袋內，然后置于盛有去離子水的容器內，每隔2小時用新的去離子水或者純水更換容器內的液體，持續透析3天后濃縮，得到純化后的家蠶絲素蛋白水溶液；

(4)制備絲素蛋白多孔材料或絲素蛋白膜：將所述純化后的家蠶絲素蛋白水溶液倒入一平整的聚苯乙烯平皿中，凍干或烘干，取出置于盛有80％乙醇的容器中浸漬2小時，或者替換為向所述純化后的家蠶絲素蛋白水溶液中添加與絲素蛋白質量比為1:0.5～1:1.0的膠黏劑聚乙二醇雙環氧丙烷醚，攪拌均勻，倒入一平整的聚苯乙烯平皿中凍干或烘干；又或者替換為：加入絲素蛋白質量20％的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和10％的N-羥基琥珀酰亞胺，再加入終濃度0.05M的2-嗎啉乙磺酸冰浴攪拌10～30分鐘后，倒入一平整的聚苯乙烯平皿中凍干或烘干，然后取出放入盛有去離子水的容器內浸泡1～2天，每隔2小時更換一次容器內的去離子水，取出后再次凍干或風干，得到絲素蛋白多孔材料或絲素蛋白膜；

(5)制備功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜：配置含終濃度10～1000nM的CGRP的膠黏劑溶液，所述CGRP的膠黏劑溶液中含有摩爾比是CGRP的1～1.5倍的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺，再加入終濃度0.05M的2-嗎啉乙磺酸，將所述絲素蛋白多孔材料浸漬于配置的CGRP的膠黏劑溶液中，溶液量以浸透絲素材料為宜，或者將所述絲素蛋白膜放回聚苯乙烯平皿中鋪平，加入20～1000ng/cm²的CGRP水溶液，然后分別加入與CGRP摩爾比為1～1.5的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺，再加入終濃度0.05M的2-嗎啉乙磺酸，輕微振蕩混合5分鐘，然后置于4℃下反應8～15小時后取出，用去離子水漂洗并凍干或在低于25℃的條件下風干，得到功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜。

2.根據權利要求1所述的功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜的制備方法，其特征在于：步驟(1)中所述將家蠶蠶絲或繭殼放入碳酸鈉水溶液中是指將家蠶蠶絲或繭殼按1g:50mL的浴比放入質量濃度為0.2％～0.8％的碳酸鈉水溶液中；所述加溫處理是指在98～100℃處理2～3次，每次處理30分鐘，所述干燥是指在60℃烘箱內干燥。

3.根據權利要求1所述的功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜的制備方法，其特征在于：步驟(2)中所述將所述脫膠后的家蠶絲素纖維完全溶解于溴化鋰水溶液中是指稱取所述脫膠后的家蠶絲素纖維，按1g:10mL的浴比溶解于9.3M的溴化鋰水溶液中，在溫度為65℃的條件下處理直至絲素纖維完全溶解。

4.根據權利要求1所述的功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜的制備方法，其特征在于：步驟(3)中所述透析袋為半透膜，截留分子量為10～16kDa，所述濃縮具體為采用旋轉蒸發器濃縮，使調整透析后的家蠶絲素蛋白水溶液的質量分數為5～15％。

5.根據權利要求1所述的功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述凍干具體為：先在溫度為-80℃～-20℃的條件下預冷凍2～24小時，再放入冷凍干燥機凍干。

6.根據權利要求1所述的功能絲素蛋白多孔材料或功能絲素蛋白膜的制備方法，其特征在于：步驟(4)中所述烘干的溫度為40℃～60℃。