[發明專利]一種具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料及其制備方法

有效

• 申請號: 201910303712.3
• 申請日: 2019-04-16
• 公開（公告）號: CN110038162B
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 王建南;丁夢瑤;田偉;裔洪根
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L27/50;A61L27/54;A61L31/04;A61L31/14;A61L31/16;A61K47/42;A61K38/23;A61P9/00
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 陸金星

本發明公開了一種具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料及其制備方法，先制備脫膠后的家蠶絲素纖維，然后制備家蠶絲素溶解液，接著制備純化后的家蠶絲素蛋白水溶液，最后制備具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料。該方法制備的產品可用于制備生物醫用材料，作為藥物載體或載藥支架，從而應用于心血管等組織疾病的治療、組織的修復或再生。該功能絲素材料屬于非溶血性材料，溶血率0.3％，具有優異的細胞相容性，更重要的是能夠顯著促進內皮細胞的粘附與增殖，同時對平滑肌細胞的增殖有一定的抑制作用，在制作人工血管或血管支架方面有利于快速內皮化和阻止內膜增生，抑制血栓形成。

技術領域

本發明涉及載藥的絲素蛋白材料的制備技術領域，具體涉及一種具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料及其制備方法。

背景技術

家蠶蠶絲是由家蠶合成與分泌的天然動物蛋白，來源廣泛，其絲素蛋白具有良好的生物相容性，由20種人體可吸收的氨基酸組成，最終降解產物為氨基酸或小肽，易被細胞吸收或吞噬，不會引起明顯的免疫反應。大量的研究表明絲素蛋白材料能夠支持多種細胞的生長，在組織工程支架中越來越多地被研究與應用。

本發明旨在開發一種載有降鈣素基因相關肽(CGRP)的絲素蛋白功能材料，應用于血管組織再生修復。CGRP是一個由37個氨基酸組成的廣泛分布于中樞和外周神經系統的活性肽，是中樞和外周神經系統傳遞信息的重要遞質。神經系統是遍布全身的調節機體各項生理功能與行為活動的系統。CGRP也是體內發現的最有效的舒血管活性肽，在調節血壓、保護心臟和防止冠狀動脈粥樣硬化有著重要作用。幾乎所有的血管中都分布著含有CGRP的神經纖維。CGRP活性肽具有刺激血管舒張，促進血管內皮細胞的增殖的作用，刺激血管內皮細胞的生長并遷移到受損血管壁。CGRP活性肽作為保護性成分，具有抑制血管平滑肌細胞增殖和遷移，參與血管損傷修復等功能。因此，將CGRP活性肽載入血管組織工程支架中用于調控缺損血管再生或功能修復具有重大的應用前景。

發明內容

本發明目的是提供一種具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料及其制備方法，是針對血管組織工程易形成血栓和血管組織再生早期舒張活性較低而開發，以促進病變和缺損血管的組織再生與功能恢復。

本發明的一種技術方案是：

提供一種具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料，該功能絲素材料加載了CGRP。

本發明的另一種技術方案是：

提供一種具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料的制備方法，該方法包括如下步驟：

(1)制備脫膠后的家蠶絲素纖維：將家蠶蠶絲或繭殼放入碳酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液或生物酶水溶液中加溫處理，清洗，拉松，干燥，得到脫膠后的家蠶絲素纖維；

(2)制備家蠶絲素溶解液：將所述脫膠后的家蠶絲素纖維完全溶解于溴化鋰水溶液中，獲得絲素溶解液；

(3)制備純化后的家蠶絲素蛋白水溶液：將所述絲素溶解液灌注于透析袋內，然后置于盛有去離子水的容器內，每隔2小時用新的去離子水或者純水更換容器內的液體，持續透析3天后濃縮，得到純化后的家蠶絲素蛋白水溶液；

(4)制備具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料。

進一步的，步驟(1)中所述將家蠶蠶絲或繭殼放入碳酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液或生物酶水溶液中加溫處理是指將家蠶蠶絲或繭殼按1g:50mL的浴比放入質量濃度為0.2～0.8％碳酸鈉或0.5～1.0％碳酸氫鈉的水溶液中在95～100℃的溫度條件下處理2～3次，或1.0～2.5g/L生物酶水溶液中在30～60℃的溫度條件下處理2～3次；每次處理30分鐘，所述干燥是指在60℃烘箱內干燥。

進一步的，步驟(2)中所述將所述脫膠后的家蠶絲素纖維完全溶解于溴化鋰水溶液中是指稱取所述脫膠后的家蠶絲素纖維，按1g:10mL的浴比溶解于9.3M的溴化鋰水溶液中，在溫度為65℃的條件下處理直至絲素纖維完全溶解。