[發明專利]一種具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料及其制備方法

有效

• 申請號: 201910303712.3
• 申請日: 2019-04-16
• 公開（公告）號: CN110038162B
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 王建南;丁夢瑤;田偉;裔洪根
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L27/50;A61L27/54;A61L31/04;A61L31/14;A61L31/16;A61K47/42;A61K38/23;A61P9/00
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 陸金星

1.一種具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

(1)制備脫膠后的家蠶絲素纖維：將家蠶蠶絲或繭殼放入碳酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液或生物酶水溶液中加溫處理，清洗，拉松，干燥，得到脫膠后的家蠶絲素纖維；

(2)制備家蠶絲素溶解液：將所述脫膠后的家蠶絲素纖維完全溶解于溴化鋰水溶液中，獲得絲素溶解液；

(3)制備純化后的家蠶絲素蛋白水溶液：將所述絲素溶解液灌注于透析袋內，然后置于盛有去離子水的容器內，每隔2小時用新的去離子水或者純水更換容器內的液體，持續透析3天后濃縮，得到純化后的家蠶絲素蛋白水溶液，其中，所述透析袋為半透膜，截留分子量為10～16kDa，所述濃縮具體為采用旋轉蒸發器濃縮，使調整透析后的家蠶絲素蛋白水溶液的質量分數為5～12％；

(4)制備具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料：

方法一：向所述純化后的家蠶絲素蛋白水溶液中添加終濃度為50～1000nM的CGRP，然后添加與所述純化后的家蠶絲素蛋白水溶液中絲素蛋白質量比為1:0.5～1:1.5的膠黏劑聚乙二醇雙環氧丙烷醚，攪拌均勻，倒入一平整的聚苯乙烯平皿中，于-80℃～-20℃冷凍2～24小時，取出材料于冷凍干燥機中凍干，然后置于盛有去離子水的容器內浸泡24小時，每隔2小時更換一次容器內的去離子水，取出后再次凍干，得到具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料；

方法二：向所述純化后的家蠶絲素蛋白水溶液中添加終濃度為50～1000nM的CGRP，然后分別加入是所述純化后的家蠶絲素蛋白水溶液中絲素蛋白質量百分數30～50％的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和15～25％的N-羥基琥珀酰亞胺，再加入終濃度為0.05M的2-嗎啉乙磺酸，冰浴攪拌10～30分鐘后，倒入一平整的聚苯乙烯平皿中于-80℃～-20℃冷凍2～24小時，取出材料于冷凍干燥機中凍干，然后置于盛有去離子水的容器內浸泡24小時，每隔2小時更換一次容器內的去離子水，取出后再次凍干，得到具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料；

方法三：將所述純化后的家蠶絲素蛋白水溶液在-80℃～-20℃溫度下預冷凍2～24小時后，用冷凍干燥機冷凍干燥，然后取出置于盛有80％乙醇的容器中浸漬2小時，再用去離子水浸泡1～2天，每隔2小時更換一次容器內的去離子水，取出后再次凍干，獲得冷凍的絲素材料，配制含終濃度10～1000nM的CGRP的膠黏劑溶液，將所述冷凍的絲素材料浸入所述膠黏劑溶液中，然后置于4℃下反應8～15小時，取出，用去離子水漂洗凍干，得到具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料，其中，所述膠黏劑溶液中含有摩爾比是CGRP的1～1.5倍的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺、含有終濃度為0.05M的2-嗎啉乙磺酸。

2.根據權利要求1所述的具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料的制備方法，其特征在于：步驟(1)中所述將家蠶蠶絲或繭殼放入碳酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液或生物酶水溶液中加溫處理是指將家蠶蠶絲或繭殼按1g:50mL的浴比放入質量濃度為0.2～0.8％的碳酸鈉水溶液或0.5～1.0％碳酸氫鈉的水溶液中在95～100℃的溫度條件下處理2～3次，或1.0～2.5g/L的生物酶水溶液中在30～60℃的溫度條件下處理2～3次，每次處理30分鐘；所述干燥是指在60℃烘箱內干燥。

3.根據權利要求1所述的具有調控血管細胞生長作用的功能絲素材料的制備方法，其特征在于：步驟(2)中所述將所述脫膠后的家蠶絲素纖維完全溶解于溴化鋰水溶液中是指稱取所述脫膠后的家蠶絲素纖維，按1g:10mL的浴比溶解于9.3M的溴化鋰水溶液中，在溫度為65℃的條件下處理直至絲素纖維完全溶解。