[發(fā)明專利]一種循環(huán)游離DNA和血細(xì)胞保存介質(zhì)

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201910302513.0
• 申請日: 2019-04-15
• 公開（公告）號: CN109997843A
• 公開（公告）日: 2019-07-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張濤;張海天
• 申請（專利權(quán)）人: 無錫芯超生物科技有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02;C12N15/10
• 代理公司: 北京潤文專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11317
• 代理人: 韓豐年

本發(fā)明涉及一種循環(huán)游離DNA和血細(xì)胞保存介質(zhì)，所述保存介質(zhì)含有以下組分：1)一種或多種保護劑；2)一種或多種螯合穩(wěn)定劑；3)一種或多種代謝抑制劑；4)一種或多種酶抑制劑；5)一種或多種防吸附劑；6)緩沖液。本發(fā)明對循環(huán)游離DNA和細(xì)胞保護效果明顯，可以在常溫下長期保存血液制劑或生物樣品，該保存介質(zhì)體系不含游離醛類物質(zhì)，降低了人體接觸添加有本保存介質(zhì)的液體樣品、生物樣品時的過敏反應(yīng)、毒性反應(yīng)，降低了保存介質(zhì)潛在的致癌風(fēng)險，有利于保持產(chǎn)品制劑、生物樣品中的核酸的完整性，確保核酸類物質(zhì)檢測的準(zhǔn)確性、科學(xué)性，給出更接近于真實的檢測結(jié)果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明公開了一種保存介質(zhì)，具體為一種循環(huán)游離DNA和血細(xì)胞保存介質(zhì)，屬于生物制劑技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

血液因其取樣方便、操作簡單，是目前生命科學(xué)研究和臨床診斷中應(yīng)用最廣的樣本，并且血液制品也廣泛應(yīng)用于臨床。傳統(tǒng)的抗凝管如EDTA抗凝管、肝素抗凝管等具有保存血樣的作用，但保存時間較短，即使在4℃的環(huán)境下保存12小時，細(xì)胞活性丟失達30-40％之多，使得樣本在一些要求更為苛刻的實驗中無法滿足要求。

液態(tài)活檢作為體外診斷的一個分支，以循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cell，CTC)檢測、循環(huán)腫瘤DNA(circulating tumor DNA，ctDNA)檢測、外泌體及循環(huán)RNA(Circulating RNA)檢測是檢測腫瘤、輔助治療的突破性技術(shù)，同時也是生殖健康領(lǐng)域的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷的突破性技術(shù)。液態(tài)活檢包括循環(huán)游離DNA循環(huán)游離DNA(cell free DNA，cfDNA)和CTC。目前市場上雖有相應(yīng)保存血液樣本的產(chǎn)品，但其功能具有單一性，無法同時滿足cfDNA、CTC或血細(xì)胞功能檢測，并且保存效果隨時間增加下降嚴(yán)重。如強生cellsave細(xì)胞保存管、羅氏cell free DNA collection tube血漿游離DNA保存管。兩種產(chǎn)品在不同程度上滿足使用者要求，但因其高昂的價格，功能單一性使得使用者承擔(dān)高額費用的同時無法得到更好的效果。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明公開了一種循環(huán)游離DNA和血細(xì)胞保存介質(zhì)。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

一種循環(huán)游離DNA和血細(xì)胞保存介質(zhì)，所述保存介質(zhì)含有以下組分：

1)一種或多種保護劑；

2)一種或多種螯合穩(wěn)定劑；

3)一種或多種代謝抑制劑；

4)一種或多種酶抑制劑；

5)一種或多種防吸附劑；

6)緩沖液。

優(yōu)選的：

所述保護劑選自已內(nèi)酰脲、噁唑烷酮類、重氮烷基脲、咪唑烷基脲、羥甲基甘氨酸鈉中的一種或多種；

所述螯合穩(wěn)定劑選自乙二胺四乙酸鹽、草酸鹽、枸櫞酸鹽中的一種或多種；

所述代謝抑制劑選自甘露聚糖、衣霉素、金精三羧酸、苦豆堿中的一種或多種；

所述酶抑制劑選自氟化鈉或者甘油醛；

所述防吸附劑選自聚乙烯醇、甜菜堿、海藻糖中的一種或多種；

所述緩沖液為甘氨酸-磷酸緩沖液；

保存介質(zhì)的pH值范圍為3.0～8.0。

優(yōu)選的，保護劑與代謝抑制劑的摩爾比為1:0.5～1:5.0。更為優(yōu)選的是，保護劑與代謝抑制劑的摩爾比為1:1。

優(yōu)選的，保護劑與酶抑制劑的摩爾比為1:0.5～1:4.0。更為優(yōu)選的是，保護劑與酶抑制劑的摩爾比為1:1。