[發明專利]一種基于自發光材料Ru@MOF-5檢測雌二醇的無標型電致化學發光傳感器的制備方法

有效

• 申請號: 201910301985.4
• 申請日: 2019-04-16
• 公開（公告）號: CN109946289B
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 曹偉;東雪;李璇;趙冠輝;苗俊聰;房靖龍;魏琴
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N27/26;G01N27/30
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240
• 代理人: 李茜

本發明涉及一種基于自發光材料Ru@MOF?5為發光體，用于檢測雌二醇的無標型電致化學發光免疫傳感器的制備方法，本發明屬于新型功能材料與生物傳感技術領域。具體是以孔隙率高、穩定性好的金屬?有機骨架復合物(MOF)材料MOF?5負載Ru(bpy)₃²⁺合成新型材料Ru@MOF?5，以此作為電致化學發光傳感平臺。合成的新型發光材料Ru@MOF?5具有自發光特性，在檢測目標物時PBS緩沖溶液中無需添加共反應劑，即可產生高且穩定的ECL信號。此策略降低了對環境的污染，且操作更為簡便。以此構建的無標型電致化學發光傳感器，用于靈敏準確檢測雌二醇。

技術領域

本發明涉及一種電致化學發光免疫傳感器的制備與應用，具體說是一種以自發光材料Ru@MOF-5為傳感平臺靈敏檢測雌二醇的無標型免疫傳感器，本發明屬于新型功能材料、生物傳感技術領域。

背景技術

雌二醇是一種是促進女性內外生殖器發育，維持女性性功能及第二性征的重要雌激素，并與孕激素協同作用，形成月經周期。體內雌激素的不同含量預示著不同的身體狀況，如體內雌二醇含量過高可能誘發卵巢疾患、心臟病、肝硬化等疾病。因此準確測定雌二醇的含量對判斷人體健康狀況有重要意義。

電致化學發光(ECL)是將電化學手段與化學發光技術相結合的一種研究方法，近幾年在免疫分析等方面受到的廣泛地關注。ECL傳感器具有高靈敏性、高選擇性、高專一性和檢出限低等優點，可快速準確的檢測待測物的含量。

金屬-有機骨架復合物(MOF)是近十年來發展迅速的一種配位聚合物，具有三維的孔結構，一般以金屬離子為連接點，有機配體位支撐構成空間3D延伸，系沸石和碳納米管之外的又一類重要的新型多孔材料，在催化，傳感，儲能和分離中都有廣泛應用。本發明中采用的MOF-5具有大的比表面積及高孔隙率，用于承載更多的Ru(bpy)₃²⁺，從而增大發光信號；此外MOF-5含有豐富的羧基基團，用于結合雌二醇抗體。將自發光材料Ru@MOF-5作為基底構建的電致化學發光免疫傳感器，能有效提高雌二醇檢測的靈敏度和特異性。

發明內容

本發明的目的之一是制備一種以Ru@MOF-5為傳感平臺的無標型電致化學發光免疫傳感器。

本發明的目的之二是將該傳感器用于雌二醇的高靈敏、特異性檢測。

本發明的技術方案如下：

1. 一種基于自發光材料Ru@MOF-5檢測雌二醇的無標型電致化學發光傳感器的制備方法如下：

（1）將玻碳電極用拋光粉打磨，再使用去離子水清洗，將電極置于5 mmol/L鐵氰化鉀溶液中，并在-0.2 ~ 0.6 V電位下進行掃描，使峰電位的差值小于110 mV；

（2）將8 μL，3 ~ 6 mg/mL Ru@MOF-5復合物溶液滴加在電極上，室溫下干燥；

（3）將8 μL，1 ~ 2 μg/mL 雌二醇抗體滴加在電極上，室溫下干燥之后，用PBS清洗，除去多余抗體，室溫下干燥；

（4）將3 μL，質量分數為1 ~ 2% BSA溶液滴加于電極上，用以封閉非特異性結合位點，干燥之后使用PBS洗去多余BSA，室溫下干燥；

（5）將8 μL，0.0005 ~ 100 ng/mL一系列不同濃度的雌二醇抗原標準溶液滴加于電極上，室溫下干燥之后，用PBS清洗，除去多余抗原，室溫下干燥。

2. 一種基于自發光材料Ru@MOF-5檢測雌二醇的無標型電致化學發光傳感器的Ru@MOF-5材料的制備步驟如下：

(1) MOF-5的制備