[發(fā)明專利]一種基于自發(fā)光材料Ru@MOF-5檢測雌二醇的無標型電致化學發(fā)光傳感器的制備方法

有效

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• 申請日: 2019-04-16
• 公開（公告）號: CN109946289B
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發(fā)明（設計）人: 曹偉;東雪;李璇;趙冠輝;苗俊聰;房靖龍;魏琴
• 申請（專利權(quán)）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N27/26;G01N27/30
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業(yè)) 37240
• 代理人: 李茜

1.一種基于自發(fā)光材料Ru@MOF-5檢測雌二醇的無標型電致化學發(fā)光傳感器的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將玻碳電極用拋光粉打磨，再使用去離子水清洗，將電極置于5 mmol/L鐵氰化鉀溶液中，并在-0.2 ~ 0.6 V電位下進行掃描，使峰電位的差值小于110 mV；

（2）將8 μL，3 ~ 6 mg/mL Ru@MOF-5復合物溶液滴加在電極上，室溫下干燥；

（3）將8 μL，1 ~ 2 μg/mL 雌二醇抗體滴加在電極上，室溫下干燥之后，用PBS清洗，除去多余抗體，室溫下干燥；

（4）將3 μL，質(zhì)量分數(shù)為1 ~ 2% BSA溶液滴加于電極上，用以封閉非特異性結(jié)合位點，干燥之后使用PBS洗去多余BSA，室溫下干燥；

（5）將8 μL，0.0005 ~ 100 ng/mL一系列不同濃度的雌二醇抗原標準溶液滴加于電極上，室溫下干燥之后，用PBS清洗，除去多余抗原，室溫下干燥。

2.如權(quán)利要求 1所述的一種基于自發(fā)光材料Ru@MOF-5檢測雌二醇的無標型電致化學發(fā)光傳感器的制備方法，其所述的Ru@MOF-5材料的制備步驟如下：

(1) MOF-5的制備

將1 ~ 3 mmol Zn(NO₃)₂·6H₂O與1 ~ 3 mmol對苯二甲酸(H₂BDC)溶解于200 ~ 300mmol 的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中，攪拌使其溶解，后將7 ~ 9 mmol三乙胺(TEA)加入混合溶液中，連續(xù)攪拌2 ~ 4小時，離心洗滌數(shù)次，將獲得的白色沉淀放置于60 ?C真空干燥箱中干燥24小時，得到MOF-5；

(2) Ru@MOF-5的制備

稱取100 ~ 200 mg的MOF-5溶解于DMF中，加入20 ~ 40 mg三(2,2'-聯(lián)吡啶)二氯化釕，70 ?C油浴加熱12小時，后通過離心洗滌收集沉淀，放置于60 ?C真空干燥箱中干燥24小時，得到Ru@MOF-5。

3.如權(quán)利要求 1所述的一種基于自發(fā)光材料Ru@MOF-5檢測雌二醇的無標型電致化學發(fā)光傳感器的制備方法，其特征在于，用于雌二醇的檢驗，檢測步驟如下：

（1）使用電化學工作站的三電極體系進行測試，Ag/AgCl電極作為參比電極，鉑絲電極為對電極，所制備的電致化學發(fā)光免疫傳感器為工作電極，將電化學工作站和化學發(fā)光檢測儀連接在一起將光電倍增管的高壓設置為800 V，循環(huán)伏安掃描電位范圍為0 ~ 1.6 V，掃描速率為0.1 V/s；

（2）在10 mL、pH 6.0 ~ 8.5的PBS緩沖溶液中，通過電化學發(fā)光方法，檢測對不同濃度的雌二醇標準溶液產(chǎn)生的電化學發(fā)光信號強度，繪制工作曲線；

（3）將待測雌二醇樣品溶液代替雌二醇標準溶液進行測定。