[發明專利]乙肝病毒前S1蛋白特異性抗體的制備方法及其應用在審
| 申請號： | 201910297150.6 | 申請日： | 2019-04-15 |
| 公開（公告）號： | CN110003326A | 公開（公告）日： | 2019-07-12 |
| 發明（設計）人： | 侯鵬云;代春迎;田曉平;趙巧輝;李桂林;付光宇;吳學煒;楊增利 | 申請（專利權）人： | 鄭州伊美諾生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C07K16/08 | 分類號： | C07K16/08;C12N5/20;G01N33/569;G01N33/577 |
| 代理公司： | 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114 | 代理人： | 王霞 |
| 地址： | 450016 河南省鄭州市*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 多肽 制備 前S1蛋白 抗合成 特異性抗體 乙肝病毒 識別位 單抗 辣根過氧化物酶標記 乙型肝炎病毒感染 鼠單克隆抗體 單克隆抗體 包被抗體 標記抗體 參考數據 人工抗原 特異性鼠 預后診斷 早期篩查 檢出率 靈敏度 免疫原 血清 抗體 合成 團隊 檢測 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種乙肝病毒前S1蛋白特異性抗體的制備方法，其特征在于：包括抗合成前S1多肽-1和抗合成前S1多肽-2的鼠單克隆抗體，制備時使用合成前S1片段多肽-1和多肽-2制備的人工抗原作為免疫原。
2.根據權利要求1所述的乙肝病毒前S1蛋白特異性抗體的制備方法，其特征在于：合成前S1片段多肽-1和多肽-2，通過在其羧基端添加的半胱氨酸，偶聯至牛血清白蛋白或者鑰孔血藍蛋白表面制備成人工抗原，用于免疫Balb/c小鼠；三次免疫后采集小鼠血清，用ELISA間接法檢測小鼠血清效價，取效價超過1/8K的小鼠脾臟與小鼠骨髓瘤細胞NS1融合；用ELISA間接法篩選特異性針對合成前S1多肽-1和多肽-2的雜交瘤細胞，注射小鼠腹腔產生腹水，通過純化小鼠腹水得到鼠單克隆抗體。
3.一種乙肝病毒前S1蛋白特異性抗體在雙抗夾心法檢測前S1蛋白的ELISA方法中的應用, 其特征在于：使用抗合成前S1多肽-1的鼠單克隆抗體和抗合成前S1多肽-2的鼠單克隆抗體共同作為包被抗體，辣根過氧化物酶標記的抗HBsAg的抗體作為標記抗體，夾心法檢測。
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