[發明專利]遲發型感音神經性耳聾致病基因DIAPH1突變檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201910294872.6
• 申請日: 2019-04-12
• 公開（公告）號: CN109852691B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發明（設計）人: 查定軍;王淑娟;溫立婷;梁鵬飛;林穎;陳俊;韓宇;李薇;李瓊;邱建華
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 范巍

1.一種用于檢測DIAPH1基因c.3575-2AG突變的試劑盒，其特征在于：該試劑盒包括用于擴增DNA片段的PCR反應試劑，所述PCR反應試劑包括PCR引物，該PCR引物擴增的目標片段包含DIAPH1基因第27號外顯子剪切位置NM_001314007:c.3575-2的堿基。

2.根據權利要求1所述一種用于檢測DIAPH1基因c.3575-2AG突變的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括用于從待測個體中提取PCR擴增所需的模板DNA的試劑。

3.根據權利要求1所述一種用于檢測DIAPH1基因c.3575-2AG突變的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括用于對PCR擴增的目標片段進行測序的試劑。

4.根據權利要求1所述一種用于檢測DIAPH1基因c.3575-2AG突變的試劑盒，其特征在于：所述PCR引物選自引物對P1，引物對P1的序列為：

DIAPH1-F-1:5’-CTTGGAGTTGGGCAGTTGTA-3’；

DIAPH1-R-1:5’-AAATGCCAACTCAAATCCCT-3’。

5.根據權利要求1所述一種用于檢測DIAPH1基因c.3575-2AG突變的試劑盒，其特征在于：所述PCR引物選自引物對P2，引物對P2的序列為：

DIAPH1-F-2:5’-CCCTGCTCTGAAACCTAACC-3’；

DIAPH1-R-2:5’-TACTCTGTAACATGGGAAGAA-3’。

6.一種如權利要求1所述的用于檢測DIAPH1基因c.3575-2AG突變的試劑盒在制備遲發型感音神經性耳聾病因學分析試劑中的應用。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于：所述檢測DIAPH1基因c.3575-2AG突變的方法包括以下步驟：

1)采集待測個體的血液、體液或組織，然后提取DNA；

2)以步驟1)提取的DNA為模板，以PCR引物進行PCR反應，得到PCR反應產物；從PCR反應產物中分離PCR反應擴增的目標片段，并對該目標片段所包含的對應于DIAPH1基因第27號外顯子剪切位置NM_001314007:c.3575-2的堿基進行分型鑒定。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于：所述分型鑒定采用對所述目標片段進行直接測序的方法，通過將測序結果與參考序列進行比對，確定待測個體對應于DIAPH1基因第27號外顯子剪切位置NM_001314007:c.3575-2的基因型或等位基因類型。

9.根據權利要求7所述的應用，其特征在于：根據比對確定的基因型包括野生純合型A/A、突變雜合型A/G或突變純合型G/G。