[發(fā)明專利]一種感音神經(jīng)性耳聾致病基因GJB2突變檢測試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910294871.1
• 申請日: 2019-04-12
• 公開（公告）號: CN109825577A
• 公開（公告）日: 2019-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 查定軍;王淑娟;陳俊;梁鵬飛;王劍;李瓊;安曉剛;李薇;邱建華
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 范巍

1.一種用于檢測GJB2基因c.2T>G突變的試劑盒，其特征在于：該試劑盒包括用于擴(kuò)增DNA片段的PCR反應(yīng)試劑，所述PCR反應(yīng)試劑包括PCR引物，該P(yáng)CR引物擴(kuò)增的目標(biāo)片段包含GJB2基因CDS區(qū)第2位所對應(yīng)的堿基。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于檢測GJB2基因c.2T>G突變的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括用于從待測個體中提取PCR擴(kuò)增所需的模板DNA的試劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于檢測GJB2基因c.2T>G突變的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括用于對PCR擴(kuò)增的目標(biāo)片段進(jìn)行測序的試劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于檢測GJB2基因c.2T>G突變的試劑盒，其特征在于：所述PCR引物選自引物對P1，引物對P1的序列為：

GJB2-F-1:5’-ATGACAAACTAAGTTGGTTCTGTC-3’；

GJB2-R-1:5’-AATCTTTGTGTTGGGAAATGC-3’。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種用于檢測GJB2基因c.2T>G突變的試劑盒，其特征在于：所述PCR引物選自引物對P2，引物對P2的序列為：

GJB2-F-2:5’-GACATCTTATCCTCACGGTTCT-3’；

GJB2-R-2:5’-CAACGAGGATCATAATGCGAA-3’。

6.一種檢測GJB2基因c.2T>G突變的方法，其特征在于：包括以下步驟：

1)采集待測個體的血液、體液或組織，然后提取DNA；

2)以步驟1)提取的DNA為模板，以PCR引物進(jìn)行PCR反應(yīng)，得到PCR反應(yīng)產(chǎn)物；從PCR反應(yīng)產(chǎn)物中分離PCR反應(yīng)擴(kuò)增的目標(biāo)片段，并對該目標(biāo)片段所包含的對應(yīng)于GJB2基因CDS區(qū)第2位的堿基進(jìn)行分型鑒定。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述一種檢測GJB2基因c.2T>G突變的方法，其特征在于：所述分型鑒定采用對所述目標(biāo)片段進(jìn)行直接測序的方法，通過將測序結(jié)果與參考序列進(jìn)行比對，確定待測個體對應(yīng)于GJB2基因CDS區(qū)第2位的基因型或等位基因類型。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述一種檢測GJB2基因c.2T>G突變的方法，其特征在于：根據(jù)比對確定的基因型包括野生純合型T/T、突變雜合型T/G或突變純合型G/G。

9.一種如權(quán)利要求1所述的試劑盒在感音神經(jīng)性耳聾病因?qū)W分析中的應(yīng)用。